近红外光谱法测定裸花紫珠提取液

裸花紫珠( Callicarpa nudiflora Hook． et Arn． ) 是 马鞭草科植物裸花紫珠的干燥叶，消炎，止血，祛风 湿和解肿毒等功效显著。裸花紫珠提取液是由 裸花紫珠药材加工提取而成，提取液作为中药制剂 生产的中间过程，对裸花紫珠颗粒的疗效具有一定 的影响。目前，药品含量测定通常采用高效液相色 谱法和紫外分光光度法等分析方法，样品前处理较 为复杂，检测时间较长，不能及时快速反馈提取液的 质量信息，导致浪费人力、物力。因此，当务之 急是建立裸花紫珠提取液含量的在线检测方法，实 现实时监测。

1 仪器与材料

1． 1 仪 器

近红外光谱分析仪 ( MPA 型，德 国 BRUKER 公司) ; 岛津 LC － 20AT 高效液相色谱仪; AB104 － N 万 分 之 一 天 平 ( 梅 特 勒 － 托 利 多) ; AUW2200 十万分之一天平 ( SHIMADZU 岛 津) ; KQ5200DE 型数控超声波清洗器( 昆山市超声仪器 有限公司)

1． 2 材料

甲酸( 分析纯) ，乙腈( 色谱纯) 。木犀 草苷对照品( 批号: 111720 － 201609) 和毛蕊花糖苷 对照品( 批号: 121582 － 201402) 均购自中国食品药 品检定研究院。 65 批裸花紫珠药材提取液，江西普正制药有限 公司提供药材。

2 实验方法

分别称取木犀草苷和毛 蕊花糖苷对照品适量，加 70% 甲醇溶液溶解，制成 浓度为 80． 2μg． mL － 1木犀草苷和 300． 4μg． mL － 1毛 蕊花糖苷混合对照品溶液。取裸花紫珠药材约 20g， 精密称定，煎煮二次，第一次加入药材总量 10 倍量 的水，武火煮沸，文火煎煮 2h，滤过，药渣再加入药 材总量 10 倍量的水，武火煮沸，文火煎煮 1h，滤过， 合并两次的煎煮液，作为供试品溶液。将裸花紫珠提取液注入样品 腔内，在 12500 ～ 3500cm － 1范围内采集 NIR 光谱，分 辨率为 8cm － 1，扫描次数为 32，每批样品采集 3 次， 取其平均光谱。

3 结果

选择不同的光谱范围，对光谱 进行内部交叉验证，以相关系数 r 和内部交叉验证 均方差 RMSECV 作为评判指标。NIR 光谱图受样品的状态、基线漂移和 高频噪音等因素影响，需采用矢量归一化法、消除常 数偏移量法和二阶导数等预处理方法，消除光谱干 扰，优化定量模型。结果如表 3 所示，木犀草苷经消 除常数偏移量法处理，r 为 0． 9476，RMSECV 为 0． 00689; 毛蕊花糖苷经矢量归一化法处理，r 为 0． 963，RMSECV 为 0． 156。共 65 批样品，根据提取液 中指标成分的含量分布范围，选择 11 批样品作为验 证集，木犀草苷剔除 1 批特异值，53 批作为校正集， 毛蕊花糖苷剔除 7 批特异值，48 批作为校正集。木 犀草苷在 12493． 2 ～ 7494． 3cm － 1 ; 6101． 9 ～ 5774． 1cm － 1光谱范围内，经消除常数偏移量法处理，选定 维数为 10，建立定量校正模型，其相关系数 r 为 0． 9476，RMSECV 为 0． 00689。毛蕊花糖苷在 6101． 9 ～ 5774． 1cm － 1 光谱范围内，经矢量归一化法处理， 选定维数为 8，建立定量校正模型，其相关系数 r 为 0． 963，RMSECV 为 0． 156。结果表明裸花紫珠提取 液光谱与木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量之间存在良 好的相关性。

4 结论

本实验采用近红外光谱技术中的偏最小二乘 法，建立裸花紫珠提取液中木犀草苷和毛蕊花糖苷 的定量分析模型，并采用验证集样本对模型进行验 证，其相关系数分别为 0． 9854 和 0． 9924。经研究 表明，近红外光谱法可以快速、准确的测定裸花紫珠 提取液中木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量。