论述莲白片的质量标准研究

莲白片是由穿心莲、白花蛇舌草、石上柏等 5 味药 材制成的薄膜衣片，具有抗癌、散结、止痛、止血等作用， 临床常用于绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、肺癌、鼻炎癌 等，与放射治疗或化学治疗配合使用可缩短疗程，加快 肿瘤消退。穿心莲为方中君药，具有清热解毒、凉血消肿 功效，主要成分为内酯类、黄酮类和甾醇类等。穿心莲内 酯具有显著的抗炎消肿作用，在穿心莲定量分析成分中 占有比率较高，可作为本品含量测定的检测指标。

KQ400KDE 型台式高功率数控清洗器 ( 功 率 为 40 ～ 100 W，工作频率为 40 kHz，昆山舒美超声仪器有限 公司) ; DHG － 9625A 型电热恒温鼓风干燥箱( 上海一恒科技有限公司) ; 全自动薄层铺板仪( 北京思普特科技有限公司) ; LB － 2D 型智能崩解时限测定仪( 上海黄海药检仪器销售有限公司) ; XP205DR 型电子天平( 十万分之 一 ，Mettler Toledo 公 司 ) ; LC － 20AD 型高效液相泵， SPD － 20A 型紫外检测器( 日本岛津公司) ，美国奥泰 SS420X 工作站; 市售硅胶 G 薄层板( 青岛海洋化工厂) ; 自 制硅胶 G 薄层板( 取硅胶 G 适量，按 1 份固定相和 3 份 含 0． 3% 羧甲基纤维素钠的水溶液进行混匀，用薄层铺 板器制成 10 cm × 20 cm、厚度 0． 4 mm 的硅胶 G 薄层板，晾干，110 ℃条件下加热 30 min，置干燥器存放) 。

乙醇、乙酸乙酯、正己烷、三氯甲烷、冰醋酸、磷钼 酸、三氯化铝、醋酸钠等(分析纯，成都市方舟化学试剂 厂); 甲醇( 色谱纯，Fisher 公司) ; 纯净水( 娃哈哈集团有 限公司) ; 齐墩果酸对照品( 批号为 110709 － 201206) ， 芦丁对照品( 批号为 100080 － 201610) ，穿心莲内酯对 照品( 供鉴别用，批号为 110797 － 201609) ，白花蛇舌草 对照药材( 供鉴别用，批号为 121183 － 201605) ，均购于 中国食品药品检定研究院; 莲白片( 实验室自制，批号分 别为 20170103，20170104，20170105) 。

取本品适量，去薄膜衣，研细，取 2 g，精密称定，加 甲醇 20 mL，超声处理 40 min，滤过，滤液浓缩至 1 mL， 作为供试品溶液。取齐墩果酸对照品适量，加甲醇溶解， 制成每 1 mL 含 0． 5 mg 的对照品溶液; 另取白花蛇舌草 对照药材 1 g，照供试品溶液制备方法同法制备对照药 材溶液。取莲白片处方中除白花蛇舌草外的药材，通过 相应制备工艺制成阴性对照品，取约 2 g，按供试品溶液 制备方法制成阴性对照品溶液。参照 2015 年版《中国药 典( 一部) 》通则 0502 项下方法，精密吸取对照品溶液 5 μL、供试品溶液及阴性对照品溶液各 10 μL，分别点 于同一硅胶 G 薄层板上，以正己烷 － 三氯甲烷 － 甲醇 ( 5 ∶ 5 ∶ 1，V / V / V) 为展开剂，上行展开 15 min，取出，晾 干，喷 10% 磷钼酸乙醇试液，在 105 ℃ 下加热至斑点显 色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液及对照药 材溶液相同位置上显相同颜色斑点，Rf 值 0． 3 ～ 0． 7，斑 点分离度良好，阴性对照无干扰。取 105 ℃减压干燥至恒重的芦丁对照品 11． 67 mg， 精密称定，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度， 摇匀，即得对照品溶液( 每 1 mL 中含芦丁 1． 167 mg) 。 取莲白片适量，去包衣，取约 3 g，精密称定，置索氏提取 器中，加三氯甲烷 70 mL，回流 3 h 脱脂，滤过，弃去三氯 甲烷，残渣挥干，加甲醇 70 mL，再加热回流 2 h，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至 25 mL 容量瓶中， 加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。称取 1． 5 g 无水 醋酸 钠，加 入 50 mL 水使 溶解 ，用冰醋 酸调 节 pH 至 4． 5 ± 0． 1，得醋酸 － 醋酸钠缓冲液( pH = 4． 5 ± 0． 1) ，备 用。称取 0． 68 g 三氯化铝，加入 50 mL 乙醇使溶解，得 三氯化铝溶液 0． 102 mol / L( 0． 1 mol / L) ，备用。取 穿 心 莲 内 酯 对 照 品 11． 62 mg，精 密 称 定 ，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得质量 浓度为 1． 162 g / L 的对照品贮备液; 精密量取上述贮备 液 1 mL，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得 质量浓度为 0． 116 2 g / L 的对照品溶液; 精密量取对照 品溶液 5 mL，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，得质量浓度为 58． 1 μg / mL 的对照品溶液。

点样量选择时，吸取对照品溶液、供试品溶液各 2， 5，10，20 μL，点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上，依法展开，按斑点清晰度和分离度选择，结 果最佳点样量为供试品溶液 10 μL、对照品溶液 5 μL。 展开剂选择时，分别以乙酸乙酯 － 甲醇 － 水( 8 ∶ 1 ∶ 1， V / V / V) 、三氯甲烷 － 乙醚( 5 ∶ l) 、甲苯 － 丙酮 － 乙 酸( 10 ∶ 2 ∶ 0． 2，V / V / V)  和正己烷 － 三氯甲烷 － 甲 醇( 5 ∶ 5 ∶ 1，V / V / V) 为展开剂展开并显色。结果采用前 3 种展开剂时特征斑点出现了分离度不好、拖尾严重、 Rf 值过高的情况; 而最后 1 种展开剂的斑点分离度较 好，斑点颜色清晰，Rf 值适中。故以正己烷 － 三氯甲烷 － 甲 醇( 5 ∶ 5 ∶ 1，V / V / V) 为展开剂。比色方法: 分别采用硝酸铝显色法和三氯化铝 显色法对莲白片中总黄酮进行测定。使用硝酸铝显 色法时，芦丁对照品溶液于 500 nm 波长处有最大吸收， 而供试品溶液于 500 nm 波长处的吸收较弱，说明莲白 片用此方法测定的专属性不强，有一定局限性。而采用 三氯化铝显色法的专属性较强，在 415 nm 波长处的干 扰小，适合测定莲白片中的总黄酮。另外，还考察过显色 时间，从加入显色剂开始，每隔 5 min 测 1 次吸光度，结 果在加入显色剂后 25 ～ 35 min 时，吸光度值变化缓慢， 无显著差异，故确定最后的显色时间为 30 min; 三氯化 铝的用量，分别加入了 0． 1 mol / L 三氯化铝溶液 0． 5， 1． 0，1． 5 mL，同法制成供试品溶液，结果随着显色剂用 量的增大，吸光度先增大后缩小，用量在 1． 0 mL 时吸光度最大。



 

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