昆山舒美超声清洗器在二仙汤中淫羊藿黄酮类成

《中医方剂临床手册》中收录了二仙汤，而这一 仅由淫羊藿、仙茅、当归、巴戟天、黄柏、知母组成的 药方，是以滋阴温肾与益精降火并重的良方，通过 这 2 个功效对人体进行双重调节，不仅对妇女更年 期综合征、性功能减退等有疗效，对骨质疏松症，肩周炎和老年性失眠也有显著的改善 作用。

仪器型号为 APS-6080A 的高效液相色 谱仪购自德国 AUPOS 科技有限公司( 其中恒温箱、 自动进样器和荧光检测器的仪器型号分别为: APS5600、Spark Alias 和 APS-5600A) ; 产品型号为 CNT SEC-300 的色谱柱购自河南奥普斯仪器设备有限公 司( 孔 径: 300 ，规 格: 4. 6 mm × 150 mm，粒 度: 5 μm) ; 产品型号为 FA2004B 的电子分析天平( 读数 精度: 0. 1 mg) 购自上海精科天平仪器厂; 产品型号 为 KQ-250DE 的台式数控超声波清洗器购自昆山市超声仪器有限公司。

所有对照品均由上海纯优生物科技有 限公司购入，其中淫羊藿苷对照品纯度≥98% ( 对照 药品批号: 489-32-7; 对照品编号: P0057) 、淫羊藿次 苷Ⅱ对照品纯度≥95% ( 对照药品批号: 489-32-7; 对照品编号: P0057) 、朝藿定 B 对照品纯度≥98% ( 对照药品批号: 110623-73-9; 对照品编号: P0355) 、朝藿 定 C 对 照 品 纯 度 ≥ 98% ( 对 照 药 品 批 号: 110642-44-9; 对照品编号: P0356) 。HPLC 级色谱纯 乙腈和 HPLC 级色谱纯甲醇均购自德国默克( MEＲCK) 公 司 ( 药品批号分别为: 75-05-8; 67-56-1 ) ; HPLC 级色谱纯甲酸购自美国飞世尔( FISHEＲ) 公 司( 药品批号: 64-18-6) ; HPLC 级色谱纯甲酸购自美 国天地( ACS) 公司( 药品批号: 631-61-8) ; 本研究中 所有的纯净水均由河南中美纯水有限公司提供。

二仙汤: 淫羊藿、仙茅、当归、巴戟 天均为 9 g，黄柏、知母均为 6 g。所有药材均由本院 药房提供。其中淫羊藿采用 4 个不同产地的药材， 分别为四川、陕西、湖南、湖北。

进样体积为 1 μL; 色谱柱的的温 度控制在 40 ℃ ; 流动相 A 以 0. 1% 色谱纯甲酸和 5 mmol /L的色谱纯乙酸铵均匀混合而成; 流动相 B 以色谱纯甲醇和超纯水均匀混合而成，研究中所有高 效液相色谱线性梯度洗脱程序均根据表 1 进行。检 测波长设置在 270 nm 时可以检测到较多的吸收峰。、

采用精确度为十万分之一 的电子分析天平精密分别精密称取淫羊藿苷对照 品、淫羊藿次苷Ⅱ对照品、朝藿定 B 对照品和朝藿定 C 对 照 品 分 别 各 19. 87 mg、19. 96 mg、11. 65 mg、 12. 03 mg，分别放置在用标签标记好 4 个对照品名 的 10 mL 容量瓶中，并用色谱纯甲醇定容至容量瓶 刻度，配制成所需质量浓度的单一对照品溶液，最终淫羊藿苷对照品、淫羊藿次苷Ⅱ对照品、朝藿定 B 对 照品和朝藿定 C 对照品的质量浓度分别为 1. 987 g / L、1. 996 g /L、1. 165 g /L、1. 203 g /L。将 4 种对照品 溶液混合摇匀后，即得混合对照品溶液。根据 1. 3 二仙汤药物组成中淫羊藿药材的用量，加入 8 倍超 纯水，煮沸后回流提取浓缩液 2 h，分别提取 3 次后， 定容在 25 mL 的容量瓶中并密闭塞紧瓶盖，后放于 超声波中进一步浓缩提取 30 min，最后采用孔径只 有 0. 2 μm 的有机过滤膜对二仙汤浓缩液进行过滤， 所得的续滤液即为淫羊藿单味药供试品溶液。

近年来，二仙汤的相关药理实验研究发现， 其中淫羊藿含有大量的黄酮类成分，本研究欲通过 对淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、朝藿定 B、朝藿定 C 等 主要黄铜类成分监测并采用 HPLC 明确各种成分含 量，为二仙汤的复方药物质量控制提供更丰富的研 究资料。高效液相色谱法作为常用快捷可靠的液相 色谱技术，为复杂体系中药复方的药物成分分离分 析提 供 了 良 好 的 平 台。HPLC 的稳定性十分良好，本研究结果也证实了这一点，因此本研究采 用 HPLC 测定二仙汤中 4 种淫羊藿黄酮类成分能够 把每次测量的误差降到最低，进一步保障检测结果 的准确性，为二仙汤的复方药物质量控制和相关新 制剂研究提供高可信度的参考依据。本研究通过比 较二仙汤水煎剂和淫羊藿单味药材水煎剂中淫羊藿 黄酮类成分含量，结果表明二仙汤中淫羊藿黄酮类 成分淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、朝藿定 B、朝藿定 C 的含量均较淫羊藿单位要从水煎剂高，这 4 种黄酮 类成分的含量以朝藿定 C 最高，淫羊藿苷次之，接着 是淫羊藿次苷Ⅱ，而朝藿定 B 含量最少。



 

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