昆山舒美介绍了梨中可溶性糖的组成和含量对梨果实的营养品质 和感官品质有重要影响。不同品种梨由于生长环境、 种属类别等因素的影响,糖组分也会有很大差异。 本文以黄金梨、皇冠梨、雪花梨为研究对象,对其中 的果糖、葡萄糖、蔗糖含量进行对比。对糖的传统测定方法主要有: 化学滴定法,分光光度法,高效液相-示差折光法。化学滴定法 对试剂、操作过程要求严格且步骤多、操作复杂、费 时,滴定终点受实验条件影响较大。分光光度法准确 度高,操作简便、快速,但只能测定糖的总含量, 不能确定糖分的组成。
黄金梨 ( 新疆产) 、黄冠梨 ( 河北产) 、雪花梨 ( 河北产) 均购于长春市共和果品超市; 果糖、葡萄 糖和蔗糖购自上海国药化学试剂公司,甲醇为色谱纯 试剂,购自美国热电飞世尔科学有限公司; 二次蒸馏 水为自制; 其他均为国产分析纯试剂。
分别称取 1. 25g 果糖、葡萄糖、和蔗糖对照品, 置于 50mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线,摇匀。 以 0. 45μm 孔径的微孔滤膜过滤 ( 聚醚砜,MEMBRANA 公司) ,吸取 20μL 滤液用于高效液相色谱分析。
分别精密称取果糖、葡萄糖、蔗糖对照品 1. 00g, 置于 3 个 50mL 容量瓶中,蒸馏水定容至刻度线,摇 匀。作为母液备用。 将果 糖、葡 萄 糖、蔗 糖 母 液 分 别 按 浓 度 梯 度 ( 0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、1. 2、1. 4、1. 6mg /mL) 进行稀 释。以 0. 45μm 孔 径 的 微 孔 滤 膜 过 滤,吸 取 20μL 滤液用于高效液相色谱分析。
分别将 3 个不同品种的梨称重,切成小块,经组 织捣碎机 ( HGB2WTS3,Waring) 粉碎 5min,将粉碎 后的浆均匀倒入玻璃皿成 2mm 左右的薄层,称重, 置于冰箱 ( Simens,博西华家用电器公司) 冷 冻 层 -20℃冷冻 1h,再经过真空冷冻干燥机 ( FDU-2100, 日本东京理化株式会社) 干燥 24h,快速放置于玻璃 干燥器中,依次快速称重,快速用研钵磨碎用保鲜膜 封存于玻璃干燥器中备用。
分别将 3 种不同品种的梨采用上述 1. 4. 1 操作冷 冻 1h 后不进行冷冻干燥,直接在 105℃的烘箱中过夜 烘干,之后快速置于干燥器中,待冷却至室温,称 重。
快速称取上述样品粉末 0. 10g 于 50mL 容量瓶中, 加入适量乙腈: 水 ( 1: 1) 混合溶液,在超声波清洗 机中 ( 舒美 KQ-300VDE,昆山超声仪器公司) 70℃, 45KHz 超声提取 0. 5h,冷却至室温后,再补充乙腈: 水 ( 1: 1) 定 容 至 刻 度 线,并摇匀。以 0. 45μm 孔径的微孔滤膜过滤,所得滤液用于高效液相色谱分 析。平行试验 3 次。
真空冷冻干燥技术能够有效的除去水分,且经该 技术处理的样品营养成分损失少。所以,本研究采 用真空冷冻干燥法对样品进行处理。经真空冷冻干燥后的黄金梨、黄冠梨、雪花梨失 去的水分占总质量的比值,分别达 83. 66%、87. 77% 和 87. 66%。经 105℃过夜烘干后的样品黄金梨、黄冠梨、雪花梨失去的总水分占总质量,分别达 84. 66%、 89. 01%和 89. 68%。梨中主要糖分果糖、葡萄糖、蔗糖都易溶于水, 升高温度可以提高糖的溶解度。使用超声提取法用乙 腈: 水 ( 1: 1) 溶液浸提样品中糖分,可以使糖分子 充分浸出,防止梨中糖分未完全浸出而带来的误差。 所以本实验采用浸提温度为 70℃,超声时间 0. 5h 。分别将果糖、葡萄糖、蔗糖对照品配制成浓度为 0. 08、0. 08、0. 04mg /mL 的溶液,以 0. 45μm 孔径的 微孔滤膜过滤,吸取适量滤液用于高效液相色谱分 析,按上述 1. 5 色谱条件测定峰面积,外标法定量计 算果糖、葡萄糖、蔗糖浓度的相对标准偏差 ( RSD, n = 6) ,相对标准偏差 ( RSD) 均小于 2. 7%。
对 3 个不同品种梨利用组织捣碎机磨成果浆,然 后采用真空冷冻干燥技术预处理,乙腈: 水 ( 1: 1) 超声波 提 取 果 糖、葡 萄 糖 和 蔗 糖,再 利 用 HPLC - ELSD 法进行定量分析,结合 SPSS 统计分析软件,通 过差异性可以准确的分析出梨中可溶性糖的组分 ( 主 要为葡萄糖、果糖和蔗糖) 、含量和不同品种梨中同 种糖的差异性比较。本实验采用的方法可用于梨中糖含量的质量分析与控制,具有实用价值。
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