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随着人民生活水平提高和社会节奏加快，心脑 血管疾病已成为危害人类的第一杀手，其中心绞痛 是由冠状动脉供血不足、心肌急剧暂时缺血缺氧所 引起的，以发作性胸痛或胸部不适为主要表现的临 床综合征。复方党参片源于国家食品药品监督管理局标准，是由党参、丹参、北沙参、当归、金 果榄加工而成的中成药复方制剂，具有活血化瘀、 益气宁心功效，主要用于心肌缺血所致心绞痛、胸闷等病症的治疗，严善福等发现它对冠心病心 绞痛的临床疗效显著，在改善气虚血瘀情况方面优 于复方丹参片，但现行质量标准及前期报道仅对该制剂中丹参所含的丹酚酸 B、丹参酮ⅡA 进 行定量研究。
中成药复方制剂成分复杂，其疗效往往是多种 成分共同作用的结果，单一组分难以全面评价其内 在质量，而多组分评价模式已成为发展趋势。因 此，本实验建立 HPLC 法同时测定复方党参片中君药党参特征成分党参炔苷，臣药丹参代表性成分丹 参素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA，臣药当归和佐药北 沙参主要成分补骨脂素、花椒毒素、佛手苷内酯、 欧前胡素、藁本内酯的含有量，为该制剂质量标准 提高和完善提供数据支持。
Agilent 1100 型高效液相色谱仪 ( 美国 Agilent 公司) ; AE240 型分析天平 ( 十万分之一，瑞士 Mettler-Toledo 公司) ; KQ-400DB 型数控超声波清 洗器 ( 昆山市超声仪器有限公司) 。复方党参片 3 批 ( 片芯 0. 32 g，批号 170501、171101、180401) 购于桂林红会药业有限公司。补骨脂素 ( 110739- 201617，含 有 量 99. 7%) 、 丹 酚 酸 B ( 111562- 201716，含 有 量 94. 1%) 、 欧 前 胡 素 ( 110826- 201616，含有量 99. 6%) 对照品均购于中国食品 药品检定研究院; 党参炔苷 ( 136085-37-5，含有 量 95. 0%) 、 丹 参 素 ( 22681-72-7， 含 有 量 98. 0%) 、丹参酮ⅡA ( 568-72-9，含有量 98. 0%) 、 花椒毒素 ( 298-81-7，含有量 98. 0%) 、佛手苷内 酯 ( 484-20-8， 含 有 量 98. 0%) 、 藁 本 内 酯 ( 81944-09-4，含有量 98. 0%) 对照品均购于上海 纯优生物科技有限公司。乙腈为色谱纯; 其他试剂 均为分析纯。
Hypersil C18色谱柱( 250 mm×4. 6 mm， 5 μm) ; 流动相乙腈-0. 1% 甲酸，梯度洗脱 ( 0 ～ 14. 5 min，24. 0% A; 14. 5 ～ 19. 0 min，24. 0% → 30. 0% A; 19. 0 ～ 32. 5 min，30. 0% → 48. 0% A; 32. 5～52. 0 min，48. 0%→72. 0%A; 52. 0～60. 0 min， 72. 0%→24. 0%A) ; 0～19. 0 min 时在 269 nm 波长 下检测党参炔苷，19. 0 ～ 32. 5 min 时在 280 nm 波长下 检 测 丹 参 素、丹 酚 酸 B、丹 参 酮 ⅡA ， 32. 5～46. 5 min 时在 310 nm 波长下检测补骨脂素、 花椒 毒 素、佛 手 苷 内 酯、欧 前 胡 素，46. 5 ～ 60. 0 min 时在 323 nm 波长下检测藁本内酯; 体 积流量 0. 9 mL /min; 柱温 30 ℃ ; 进样量 10 μL。
精密称取各对照品适量，75% 甲醇分别制成含党参炔苷 4. 992 mg /mL、丹参素 0. 936 mg /mL、丹酚酸 B 9. 894 mg /mL、丹参酮ⅡA 1. 482 mg /mL、补骨脂素 0. 518 mg /mL、花椒毒素 1. 104 mg /mL、佛手苷内酯 0. 392 mg /mL、欧前胡 素 0. 276 mg /mL、藁本内酯 6. 212 mg /mL 的贮备 液，各精密吸取 2. 5 mL 置于 50 mL 量瓶中，75% 甲醇 定 容，即 得 ( 质 量 浓 度 分 别 为 0. 249 6、0. 046 8、0. 494 7、0. 074 1、0. 025 9、0. 055 2、 0. 019 6、0. 013 8、0. 310 6 mg /mL) 。
取片剂适量，除去糖衣后研成 细粉，混匀，精密称取约 2. 0 g，置于 25 mL 具塞 锥 形 瓶 中，精 密 加 入 75% 甲 醇 20 mL，超 声 ( 400 W、40 kHz) 提取 30 min，放冷，75% 甲醇 定容至刻度，摇匀，滤过，即得。
按照片剂质量标准项下的处 方和制法，分别制备缺党参、丹参、北沙参、当归 的阴性样品，按 “2. 3”项下方法制备，即得。
精密吸取对照品、供试品、 阴性样品溶液适量，在 “2. 1”项色谱条件下进样 测定，各成分色谱峰峰形 对称，与相邻峰分离度均大于 1. 5，理论塔板数按 各成分计均大于 3 500。
精密吸取 “2. 2”项下贮 备液适量，75%甲醇稀释 20 倍，在 “2. 1”项色谱 条件下进样测定。以溶液质量浓度为横坐标 ( X) ， 峰面积为纵坐标 ( Y) 进行回归，结果见表 1，可 知各成分在各自范围内线性关系良好。
，精密吸取 “2. 2”项下对照 品溶液，在 “2. 1”项色谱条件下进样测定 6 次， 测得党参炔苷、丹参素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA、 补骨脂素、花椒毒素、佛手苷内酯、欧前胡素、藁 本内酯峰面积 ＲSD 分别为 0. 71%、1. 10%、0. 56%、 0. 72%、1. 04%、0. 95%、1. 12%、1. 25%、0. 62%， 表明仪器精密度良好。
取同一批片剂6份，按 “2. 3”项下方法制备供试品溶液，在 “2. 1”项色 谱条件下进样测定，测得党参炔苷、丹参素、丹酚 酸 B、丹参酮ⅡA、补骨脂素、花椒毒素、佛手苷 内酯、欧 前 胡 素、藁 本 内 酯 含 有 量 ＲSD 分 别 为1. 63%、1. 70%、0. 47%、1. 69%、0. 54%、1. 71%、 1. 80%、0. 85%、1. 55%，表明该方法重复性良好。
取同一份供试品溶液，于 0、 2、4、8、12、24 h 在 “2. 1”项色谱条件下进样测定，测得党参炔苷、丹参素、丹酚酸 B、丹参酮 ⅡA、补骨脂素、花椒毒素、佛手苷内酯、欧前胡 素、藁本内酯峰面积 ＲSD 分别为 0. 65%、1. 09%、 0. 60%、0. 76%、1. 07%、1. 01%、1. 15%、1. 20%、 0. 66%，表明溶液在 24 h 内稳定性良好。
取含有量已知的片剂6份，除去糖衣后研成细粉，混匀，精密称取约 1. 0 g，置 于 25 mL 具 塞 锥 形 瓶 中，精 密 加 入 0. 931 mg /mL 党参炔苷对照品溶液 4. 0 mL、 0. 541 mg /mL 丹参素对照品溶液 1. 0 mL、 1. 431 mg /mL 丹 酚 酸 B 对 照 品 溶 液 5. 0 mL、 0. 962 mg /mL 丹 参 酮 ⅡA 对 照 品 溶 液 1. 0 mL、 0. 329 mg /mL 补骨脂素对照品溶液 1. 0 mL、 0. 648 mg /mL 花椒毒素对照品溶液 1. 0 mL、 0. 216 mg /mL 佛手苷内酯对照品溶液 1. 0 mL、 0. 155 mg /mL 欧前胡素对照品溶液 1. 0 mL、 0. 877 mg /mL藁 本 内 酯 对 照 品 溶 液 5. 0 mL，按 “2. 3”项下方法制备供试品溶液，在 “2. 1”项色 谱条件下进样测定，计算回收率。结果，党参炔 苷、丹参素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA、补骨脂素、 花椒毒素、佛手苷内酯、欧前胡素、藁本内酯平均 加样 回 收 率 ( ＲSD) 分 别 为 98. 33% ( 1. 12%) 、 97. 70% ( 0. 95%) 、100. 23% ( 0. 78%) 、99. 45% ( 1. 40%) 、98. 49% ( 1. 32%) 、98. 79% ( 0. 84%) 、 97. 86% ( 1. 26%) 、 96. 97% ( 1. 59%) 、 99. 12% ( 0. 87%) 。 2. 7 样品含有量测定 取 3 批片剂，按 “2. 3” 项下方法制备供试品溶液，在 “2. 1”项色谱条件 下进样测定，计算含有量，结果见表 2。
本实验以待测成 分提取率为评价指标，考察了提取溶剂 ( 甲醇、75% 甲醇、50% 甲醇、乙醇) 、提取 方式 ( 超 声 提 取、回 流 提 取) 、提 取 时 间 ( 15、 30、60 min) 对供试品溶液的影响，最终确定其制 备方法为 75%甲醇超声提取 30 min。
本实验以待测成分峰形、分 离度、色谱峰基线平稳状况为评价指标，考察了流 动相 ( 乙 腈-水、乙 腈-0. 1% 甲 酸、乙 腈0. 1%磷酸) 对测定结果的影响，最终确定乙 腈-0. 1%甲酸作为流动相进行梯度洗脱，此时待测 成分与其他杂质的分离度符合 《中国药典》要求， 而且色谱峰基线平稳，峰形对称。
本实验采用 HPLC 法同时测定了复方党参片中 党参炔苷、丹参素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA、补骨 脂素、花椒毒素、佛手苷内酯、欧前胡素、藁本内 酯的含有量，该方法准确度高，重复性好，可用于 该制剂质量标准的提高和完善。
