测定饮料中的5种添加剂（KQ-500DE使用）

食品添加剂是指为改善食品品质和色、香、味， 以及为防腐和加工工艺的需要而加入食品中的化学 合成或者天然物质。近年来，随着食品工业的发 展，食品添加剂使用频率越来越多，违规使用或超 量使用食品添加剂问题也越频繁，食品质量安全问 题也越来越受到各方的关注。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

菠 萝啤 、 梨 汁、 水蜜 桃汁， 市售； 乙 酸 铵 （CH3CO2NH4，优级纯），国药化学试剂有限公司提 供；甲醇 （色谱纯），赛默飞世尔科技有限公司提供； 安赛蜜标准溶液 （DRE- C1001800）、糖精钠标准溶液 （DRE- C16901010），Dr.Ehrenstorfer 公司提供；山梨 酸标准溶液 （BW900997- 1000- L，1 000 μg/mL）、苯 甲酸标准溶液 （BW900998- 1000- L，1 000 μg/mL）， 坛墨质检标准物质中心提供；脱氢乙酸标准溶液 （21680），北京曼格生物科技公司提供。 注：实验室用水是由 Milli- Q Advantage A10 系 统制备的高纯水，所用容器使用前均用超纯水清洗 晾干。

1.2 仪器与设备

Agilent 1290 系列 （DAD 检测器） 高效液相色谱 仪，美国安捷伦科技有限公司产品；Mill- Q Advantage A10 型纯水器，美国 Millipore 科技有限公司产 品；MS303S 型分析天平，瑞士梅特勒 - 托利多科技 有限公司产品；UV2600 型紫外可见光分光光度计， 岛津公司产品；昆山舒美KQ-500DE，昆山市超声仪器有限公司 产品。

1.3 溶液配制

1.3.1 流动相

溶剂 A （0.02 mol/L 乙酸铵溶液） 称取乙酸铵 1.54 g，用水溶解，定容至 1 000 mL 容量瓶，经 0.22 μm 微孔滤膜过滤，超声脱气 30 min；溶剂 B 为色谱纯甲醇。 1.3.2 亚铁氰化钾溶液 称取 106 g 亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水 定容至 1 000 mL。

1.3.3 乙酸锌溶液

称取 220 g 乙酸锌溶于少量水中，加入 30 mL 冰 醋酸，用水定容至 1 000 mL。

1.3.4 安赛蜜标准储备溶液 （1 000 μg/mL）

准确称量安赛蜜标准品 0.10 g 用水溶解，定容 至 100 mL 容量瓶。

1.3.5 糖精钠标准储备溶液 （1 000 μg/mL）

准确称量糖精钠标准品 0.10 g 用水溶解，定容 至 100 mL 容量瓶。

1.3.6 脱氢乙酸标准储备溶液 （1 000 μg/mL）

准确称量脱氢乙酸标准品 0.10 g 用水溶解，定 容至 100 mL 容量瓶。

1.3.7 5 种添加剂混合标准中间溶液（50 μg/mL）

分别吸取安赛蜜、糖精钠、脱氢乙酸标准溶液 储备液，以及山梨酸、苯甲酸标准溶液 2.5 mL 用水 稀释定容至 50 mL。

1.3.8 5 种添加剂混合标准系列工作溶液

分别准确吸取混合标准中间液 20，40，100， 200，400，1 000 μL，加水定容至 1 mL，分别配制 质量浓度为 1，2，5，10，20，50 μg/mL 的混合标 准系列工作溶液。

1.4 试验方法

1.4.1 样品处理

称取约 5.000 g 样品于 50 mL 比色管中，加水约 25 mL 涡旋混匀，含二氧化碳样品置于超声清洗仪中 超声处理 20 min，不含蛋白质样品直接加水定容至刻 度，含蛋白质样品分别加入 5 mL 亚铁氰化钾溶液， 5 mL 乙酸锌溶液，然后加水至刻度，混匀，以转速 8 000 r/min 离心 5 min，将上清液收集经 0.22 μm 滤 膜过滤，上机待测。同样方法作空白样。 （注：不 含蛋白的饮料可以不加如亚铁氰化钾和乙酸锌溶液）

1.4.2 色谱条件

色谱柱：Venusil ASB C18 柱，4.6 mm×250 mm， 5 μm；进样量 10 μL，柱温 35 ℃，DAD 检测器检测 波长 230 nm，流动相 A 0.02 mol/L 乙酸铵溶液，流 动相 B 甲醇，A∶B = 95∶5，等梯度洗脱。

1.4.3 标准曲线

将配制好的混合标准系列工作溶液在 1.4.2 中色 谱条件下进行分析，以混合标准系列工作溶液浓度 为横坐标 （X）、相应峰面积为纵坐标 （Y），绘制标 准工作曲线。

2 结果与分析

由于饮料中会不同程度地添加果胶、黄瓜胶、 羧甲基醋酸纤维钠等添加剂来增加口感，因此对有 些含乳饮料在前处理过程中需要沉淀蛋白，试验选 择亚铁氰化钾和乙酸锌溶液作为蛋白沉淀剂。与国 标不同的是，标准 GB/T 23377—2009 食品中脱氢乙 酸的测定中，针对果蔬汁的测定中需要调节 pH 值， 用 固 相 萃 取 柱 来 提 取 ， 过 程 繁 琐 复 杂 ； GB/T 5009.140—2003 饮料中乙酰磺胺酸钾 （安赛蜜） 的 测定中，样品处理过程也需要用固相萃取柱上样、 洗脱，过程繁琐。采用超声提取方法简单、便于操 作，大大减少了前处理的时间，同时保证结果的准 确性。由于这几种添加剂都易溶于水，且超声提取 过程中可以加快分子运动，加速沉淀剂与溶剂之间 的接触，促使某些成分脱附、溶解，加快提取过程， 增大效率，经过多次试验分析得知，超声提取 20 min 即可满足加标回收率要求。多种物质同时检测时，不仅要保证每种组分的 灵敏度，还需定量方法简便。试验采用分光光度计 在 190~400 nm 范围内对各组标准溶液进行光谱扫 描，分析安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙 酸这 5 种添加剂的吸光度图谱可知，这 5 种组分的最 大吸收波长依次为 228，220，226，254，235.5 nm。 为兼顾各组分的检测灵敏度，最终选择 230 nm 作为 检测波长，此条件下绘制检测色谱图，可以完全分离，且分离效果较好。

3 结论

采用高效液相色谱检测法，可同时测定饮料中安 赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸这 5 种常 见的食品添加剂，检测结果准确、分析时间短，具 有较高的灵敏度和准确度，且方法操作简单、实用 性强，能够满足实际工作的需要，为食品监管部门、 企业等检测机构提供技术支持。



 

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