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蔬菜提取方法?昆山舒美超声波清洗器!

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-07-05 16:17【
如今对于食品中 PAHs 的研究主要为油脂及油炸食品,对应的提取检测方法也比较成熟,如索氏提取法、舒美超声波清洗器萃取法、微波辅助萃取法、加速溶剂提取法、凝胶渗透色谱法等。崔艳红等研究蔬菜中 PAHs 的提取和测定方法,首先 50 ℃烘干制样,采用加速溶剂提取法,经硫酸磺化和氟罗里硅土柱净化后用 GC-MS 检测,回收率在 64% - 124%。张婷婷等研究青岛市松针中 PAHs 的含量,采用索氏提取、氧化铝 - 硅胶净化柱净化、GC-MS分析的方法,测定该方法的提取净化效率在 70.8% 以上。龙明华等研究南宁市蔬菜体内PAHs 含量,采用烘干样品,超声萃取,弗罗里硅土柱净化后使用 HPLC 检测,该方法回收率在69.01% ~ 149.26%。高娟等测定植物提取物中PAHs含量,以环己烷为溶剂超声提取,经硫酸净化后用 GC-MS 检测。王雅琴等研究植物叶片中 PAHs 含量,采用冷冻干燥的方式处理样品,硅胶净化和浓缩后用 GC-MS 检测。蔬菜作为人们膳食主要组成之一,但蔬菜体内 PAHs 的含量及机理研究较少,提取方法的不成熟成为其主要影响因素之一。这主要是蔬菜体内的脂溶性色素、脂肪酸、甾类等物质,对 PAHs 的定性、定量产生影响。以上研究中 PAHs 检测仪器主要集中于 HPLC 及 GC-MS,仪器方法也较为成熟,但蔬菜样品的前处理技术存在不足,多采用烘干或冷冻干燥的方式制备样品,时间长,不适合大量样品检测。并且上述前处理方法,仅通过加标实验测定回收率,以此确定前处理方案,但蔬菜样品成分复杂且各成分与 PAHs 的共存关系尚不明确,所加标准品无法达到自然存在状态,故以加标样品为试材的方法存在不足。

以娃娃菜、油麦、豆芽、白萝卜、茄子为样品,分别采用烘干制样和鲜样匀浆制样的方式制备试材,经相同提取检测处理,发现鲜样样品中 PAHs 提取量和检出率均高于烘干样品。本实验以叶用莴苣为实验对象,鲜样打浆处理制备试材,采取单因素和正交实验的方法优化试验方案,利用 HPLC 测定不同前处理后蔬菜体内 PAHs 残留量,并对提取效果最好的处理方案采取低、中、高三个阶段的加标回收率实验,验证前处理方案。
 
仪器:BSA124S电子精密天平 德国赛多利斯;Waters-e2695 高效液相色谱系统 美国Water 公司;SUPELCOSILTM LC-PAH 液相色谱柱 美国 Supelco 公司;KQ-400DE超声波清洗机 昆山舒美超声仪器有限公司;RE-52A 旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂;3K15 高速冷冻离心机 德国 sigma 公司;ZGDCY-12 干式氮吹仪 上海梓桂仪器有限公司;L18-YL08打浆机 九阳股份有限公司;Vortex-Genie2 涡旋混匀器 美国 Scientific Industries 公司。
 
莴苣体内PAHs提取、净化工艺流程
莴苣匀浆→加入提取剂→超声波提取→离心(8000 r/min,5 min)→重复 3 次,合并提取液→硫酸磺化→2%的无水硫酸钠溶液洗脱→减压浓缩至 3 mL→弗罗里硅土柱净化→洗脱液浓缩→过 0.22 μm 滤器→PAHs 粗提液取一定质量的莴苣叶片鲜样制成匀浆置于离心管待测,取 40 mL 正己烷溶液与之混合,涡旋 2 min 后在 20 ℃、超声波功率 480 W 条件下提取 20 min,8000 r/min 下离心 5 min,重复提取 3 次,合并上清液。
 
磺化阶段:将提取液转入分液漏斗中,向其中添加 10 mL 浓度为 60%的硫酸溶液进行磺化,震荡 5 min,如有乳化则用 30 mL 2%无水硫酸钠溶液破乳,静置分层后弃去水相,将有机层于旋转蒸发仪浓缩至 3 mL 左右,进行固相萃取净化程序。将浓缩液置于 5 mL 正己烷活化的弗罗里硅土柱,上样后用 12.00 mL 洗脱液(二氯甲烷:正己烷=2V:8V)洗脱。收集洗脱液,利用干式氮吹仪蒸发至干,转化溶剂为 1.5 mL 乙腈,过 0.22 μm 有机滤器后用HLCP/UV 测定 PAHs 含量,通过比较 PAHs 残留量高低,确定适宜的工艺参数。
 
通过单因素分析和正交实验建立蔬菜体内 PAHs 检测前处理工艺,得出影响检测 PAHs残留量的各因素主次顺序是:洗脱液配比>样品质量>硫酸浓度>提取液体积>硫酸体积>超声时间。最佳处理条件:提取液体积 48mL、样品质量 13 g、超声波提取时间 30 min、硫酸体积13 mL、硫酸浓度35%、洗脱液类型6 mL正己烷和6 mL二氯甲烷/正己烷(V1:V2=3:7),在此条件下测得莴苣体内 PAHs 含量最高为 961.541 μg/kg;此工艺条件下进行加标回收率实验验证,得出加标回收率为 80.54%~142.04%,RSDs 为 1.35%~8.96%,具有较好的准确度和精密度。综上得出该前处理工艺提取效果好、制样简单可应用于蔬菜体内 PAHs 提取,为蔬菜体内 PAHs 变化机理研究奠定基础。