电磁裂解水提取工艺优化-KQ5200DE的使用！

柴胡始载于《神农本草经》，为伞形科植物柴胡（Bupleurum chinense DC.）或 狭 叶 柴 胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.）的干燥根，被列为上品，是具有一种 2 000多年药用历史的传统中药，具有和解退热、疏肝解 郁、升举阳气之功效 。现代药理学研究表明，柴胡具 有抗炎、抗病毒、保肝、降血脂、免疫调节等作用 ，临床 常用含柴胡的药物有柴胡口服液、柴胡注射液、柴胡片、 柴胡滴丸等。柴胡主要含皂苷类、黄酮类、多糖类、挥发 油类等成分 ，其中皂苷类成分是其药效物质基础之 一，主要成分柴胡皂苷a和柴胡皂苷d也是柴胡含量测 定的指标性成分。

1 材料

1.1 仪器

1260 型 HPLC 仪，包括四元梯度泵、可变波长扫描 紫外检测器、自动进样器、色谱工作站（美国 Agilent 公 司）；KQ5200DE型超声波清洗器（昆山舒美超声仪器有限公司）；电磁裂解仪（长春中医药大学中药药剂实验室 自制，专利号：ZL201721353456.1）；L-204型万分之一电子分析天平、AB135-S 型十万分之一电子分析天平（瑞 士Mettler-Toledo公司）。

1.2 药品与试剂

柴胡皂苷 a 对照品（批号：P03M9F50593，纯度：≥ 98％）、柴胡皂苷d对照品（批号：Z08A8L33357，纯度：≥ 98％）均购自中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯， 其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

1.3 药材

柴胡饮片（批号：171101）购于酒泉市培丰中药材生 态种植加工有限公司，经长春中医药大学药学院翁丽丽 教授鉴定为柴胡（B. chinense DC.）的干燥根。

2 方法与结果

2.1 柴胡水提液中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量测定

采用 HPLC 法测定柴胡水提液中柴胡皂苷 a、柴胡 皂苷d的含量。

2.1.1 色谱条件

色谱柱：SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脱（0～50 min， 25％A→90％A；50～55 min，90％A）；柱温：40 ℃；流速： 1.0 mL/min；检测波长：210 nm；进样量：10 μL。在该色 谱条件下，各成分分离度均大于2.5，理论板数以柴胡皂 苷a、柴胡皂苷d计均不低于35 000，阴性溶液对测定无 干扰，详见图2。

2.1.2 混合对照品溶液的制备

取柴胡皂苷a对照品、 柴胡皂苷d对照品各适量，精密称定，置于同一25 mL量 瓶中，加甲醇溶解并定容，制成柴胡皂苷 a、柴胡皂苷 d质量浓度分别为 202.80、202.00 μg/mL 的混合对照品 溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备

取药材样品适量，粉碎后过 筛（目数参考最优工艺），精密称取300.0 g，置于电磁裂 解仪中，按设定的试验条件加入一定比例的水提取，滤 过，取滤液3.0 mL，60 ℃挥干，置于10 mL量瓶中，加甲 醇溶解并定容，摇匀，即得。

3 讨论

本研究采用 HPLC 法测定了以电磁裂解法提取的柴胡水提液中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量，该方法 精密度、稳定性、重复性均较好，可用于同时测定柴胡水 提液中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。采用单因素试 验对影响柴胡皂苷a和柴胡皂苷d提取的4个因素即提 取次数、提取时间、物料粒度、料液比进行优化。综合考 虑单因素试验结果及节能、省时、经济等因素，确定提取 次数为 1 次，仅对其余 3 个因素通过 Box-Behnken 响应 面法进行优化，得到最优提取工艺为提取时间2.50 min、 过80目筛、料液比1 ∶ 28（g/mL）。验证试验得总提取率为 8.42 mg/g。与超声法和煎煮法相比，电磁裂解法提取的 总提取率最高，提取时间最短。