舒美牌超声波清洗机用于白藜芦醇和亚麻籽油复

脂质纳米粒（lipid nanoparticle，NP）是基于脂 质的极有效的药物传输系统， 主要分为固体脂质 纳米粒（solid lipid nanoparticle，SLN）和纳米结构 脂 质 载 体 （nanostructured lipid carrier，NLC）两种。 NLC 由 SLN 改进而成，它以一定比例的液态 脂质和固态脂质为混合类脂，代替 SLN 中的固态 脂质作为载体材料。 与传统的基于液态脂质的给 药系统（乳液、脂质体等）相比，NLC 有更多优点： 高稳定性、高包封率；保证亲脂性成分被保护、控 制和靶向释放，提高了生物利用度，且低毒性，可 低价工业化生产等。

1 材料与仪器

1.1 材料

白藜芦醇（Res，98%，上海德恩得医药科技有 限公司），亚麻籽油（加拿大 TA Foods 公司），中链 甘油三酯（MCT，印度尼西亚 Britz 公司），单硬脂 酸甘油酯（GMS，莘县新星油脂有限公司），六聚甘 油单硬脂酸酯（P6，上海日光化学贸易有限公司）， 水性单甘脂（广州胜欣化工科技有限公司），甘油 （Biosharp 公 司），1，1-二 苯 基-2-苦 肼 基（DPPH， 东京化成工业株式会社），硫氰酸铵（上海麦克林 生化科技有限公司），2-硫代巴比妥酸（TBA，国药集团化学试剂有限公司）。

1.2 设备与仪器

FB-110Q 高压均质机， 上海励途机械设备工 程有限公司；RW20 型数显型悬臂搅拌器，德国 IKA 公司；EMS-20 水浴磁力搅拌器， 金坛市岸头 仪都仪器厂；JEM-2100 透射电子显微镜， 日本电 子株式会社；a-1900PC 紫外可见分光光度计，上海谱元仪器有限公司；D8-Discover X 射 线 衍 射 仪，德国 Bruker 公司；DSC-8000 差式扫描量热分 析仪，美国 PerkinElmer 公司；N4 Plus 亚微米粒度 分 析 仪， 美 国 Beckman Coulter 公 司；DNP-9052 电热恒温培养箱， 上海精宏实验设备有限公司； KQ-250DE 型数显超声波清洗器， 昆山舒美超声仪 器有限公司；ZF-2 型三用紫外仪， 上海市安亭电 子仪器厂。

2 试验方法

采用热高压均质法制备 NLC。分别称取一定 量的单硬脂酸甘油酯、 中链甘油三酯、 水性单甘 脂、六聚甘油单硬脂酸酯，70 ℃混匀后加入白藜芦 醇和亚麻籽油，继续搅拌至形成油相，将同温度的 去离子水和甘油混匀后边搅拌边加入到油相中， 以上混合物继续搅拌， 最后通过预热的高压均质 机处理， 高温液体冷却后得白藜芦醇和亚麻籽油 复配的纳米结构脂质载体（RL-NLC）。样品稀释后用 N4 Plus 亚微米粒度分析仪测 量其粒径分布，测量温度 25 ℃，测量角度 90°，平 衡时间 10 min。样品稀释后滴在铜网上，用 1％磷钨酸水溶液 负染，风干后放在透射电镜下观察。绘制 Res 在 307 nm 处的标准曲线，采用紫外 分光光度法测定 Res 的含量和包封率。 量取 60 μL 样品（RL-NLC），乙醇稀释至 25 mL，超声破乳 30 min 后测得在 307 nm 处的吸光度，代入标准曲 线方程计算出 Res 的含量 W1。用透析袋法进行体外模拟释放研究， 释放介 质为水、吐温 80 和乙醇（80∶2∶20，V/V）。 白藜芦 醇乙醇溶液（R-Ethanol）为 直 接 把 Res 溶 解 在 乙 醇中形成的液体。 试验时将 2 mL RL-NLC 或 REthanol 样品置于截留分子质量为 10 ku 的经浸泡 处理的透析袋中，夹紧两端，然后悬浮于盛有 200 mL 释放介质的烧杯中，37 ℃水浴条 件 下 缓 慢 搅 拌。 分别在 0.5，1，1.5，2，4，6，8，10，12 和 24 h 时， 取出 1 mL 释放介质， 同时补充 1 mL 同温度的释 放介质， 稀释并用 0.45 μm 膜过滤后检测 Res 的 含量，绘制 Res 的累积释放曲线。

3 结果和讨论

测 得 RL-NLC 的 粒 径 为 104.9 nm ± 3.4 nm， PDI 为 0.216 ± 0.025。 PDI 用于衡量颗粒的粒径分 布宽度，一般来说，PDI 越大，表示颗粒大小相差 越大，PDI 越小，表示颗粒大小越均一，该体系的PDI<0.3， 说明 RL-NLC 具有较窄的粒径分布，均 一性较好。 RL-NLC 的 包 封 率 与 Res 的生物利用度相 关， 包封率高的载体的应用价值往往较高。 RLNLC 的包封率为 98.4% ± 0.2%， 说明 Res 被很好 地包裹在脂质颗粒中。长 链 脂 肪 酸 GMS 在 2θ=19.6°和 2θ=23.7°处 分别表现出 β 型（三斜晶体结构）和 β′型（正交晶 体结构） 晶体结构的较强衍射峰， 而制备的 NLC 在 2θ=21.5°处也有衍射峰， 这是 α 型 （六边形结 构）晶体结构的特征，这是因为在 NLC 的冷却过 程中，GMS 倾向于无序的 α 型晶体结构。 随着时 间和温度的变化，α 型会经由 β' 型转变为 β 型，但 是 NLC 中液态脂质的加入会阻碍脂质的结晶。DSC 可用于评价纳米载体中脂质的状态 。 GMS 在 61.3 ℃处出现吸热峰，而 RL-NLC 的升温 曲线中吸热峰为 41.5 ℃， 这说明在升温过程中出 现了固体脂质的融化现象， 由此证明 RL-NLC 中 的脂质基质主要呈固态， 具有脂质纳米粒的特征。 吸热峰的移动可以证明脂质基质中晶格缺 陷的存在， 这种晶格缺陷可能是由于液态脂质的 加入。

4 结论

使用热高压均质法成功制备出了白藜芦醇和 亚麻籽油复配的纳米结构脂质载体， 该体系具有 良好的物理稳定性、光稳定性和缓慢释放的特点。 DPPH 自由基清除试验的结果证明了白藜芦醇的 抗氧化活性和亚麻籽油对它的促进作用。 此外，脂 质的加速氧化研究中发现，NLC 的固态核结构抑 制了亚麻籽油的氧化， 并且白藜芦醇的抗氧化作 用显著。 本文研究的白藜芦醇和亚麻籽油载体，在 功能食品领域具有潜在的应用价值。