甘松化学成分的研究

败酱科甘松属共有3种植物,即甘松NardostachyschinensisBatal.､匙叶甘松NardostachysjatamansiDC.､大花甘松NardostachysgrandifloraDC.[1],其中甘松又名苦弥哆､甘松香､香松､人身香､麝果､邦贝[2],是我国二级保护藏药,也是目前败酱科植物唯一被《中国药典》收录的,具有抗心律失常[3]､抗心肌缺血[4]､抗氧化[5]､止痛､抗疟[6]等多种生物活性,主要分布于青海､四川､云南和西藏[1],从中分离得到的化学成分主要有黄酮类､香豆素类､木脂素类､新木脂素类[7],以及各种类型的倍半萜(如马兜铃烷型倍半萜､甘松新酮型倍半萜､愈创木烷型倍半萜､lemnalane型倍半萜[8]等)｡本实验对甘松95%乙醇提取物进行研究,从中分离得到10个化合物,其中化合物8是甘松的特征成分,9~10为首次从甘松属中分离得到｡

LC-20AT 高效液相色谱仪 ( 日本岛津公司) ; Waters 600 半制备液相色谱仪､Waters 2545 液相质谱联用仪 ( 美国 Waters 公司) ; YMC-Pack ODSA 色谱柱 ( 150 mm× 20 mm,5 μm) ; RE-2000 旋 转蒸发器 ( 上海亚荣生化仪器厂) ; SHZ-D-Ⅲ循环 水真空泵 ( 巩义市予华仪器有限责任公司) ; KQ500DE 型数控超声波清洗器 ( 昆山市超声仪器有 限公司) ｡ 柱层层析硅胶 ( 200 ~ 300 目,青岛海洋化工 有限 公 司) ; ODS 柱 填 料 ( 日 本 YMC 公 司) ; Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶 ( 瑞典 GE Healthcare 公司) ｡氯仿､甲醇､石油醚 ( 沸程第Ⅱ类,60 ~ 90 ℃ ) ､丙酮均为分析纯 ( 天津富宇精细化工有限 公司) ; 甲 醇 为 色 谱 纯 ( 德 国 Merck 公 司) ; 水 ( 中粮可口可乐饮料新疆有限公司) ｡ 甘松于 2016 年 9 月采自湖北,经石河子大学 药学院吴增宝副教授鉴 定为甘松 Nardostachys chinensis Batal.,标本 ( GS201609) 存放于新疆植 物药资源利用教育部重点实验室｡

将干燥的甘松 ( 4. 0 kg) 粉碎,分别用 20 L 95%乙醇提取 3 次,2 h /次,减压浓缩提取液,得 到总浸膏 426. 0 g｡采用硅胶柱对总浸膏进行分段,分别以 CHCl3-MeOH ( 10 ∶ 1､5 ∶ 1､2 ∶ 1) 为流 动 相 进 行 洗 脱,得 浸 膏 Fr. 1 ( 118. 0 g ) ､Fr. 2 ( 131. 2 g) ､Fr. 3 ( 76. 8 g) ｡

取 Fr. 1 部分,经硅胶柱氯仿-甲醇 ( 10 ∶ 1) 再次分离､薄层色谱检识,得到 6 个流份 Fr. 1A ~ Fr. 1F｡Fr. 1A 中析出白色针羽状晶体,以 95%乙 醇重结晶得到化合物 1 ( 12. 5 mg) ; Fr. 1C 经反相 硅胶柱色谱甲醇-水 ( 1 ∶ 4､2 ∶ 3､3 ∶ 2､4 ∶ 1､ 1 ∶ 0) 梯度洗脱,得 Fr 1C1-Fr 1C5 5 个流份,再采 用 反 相 硅 胶 柱 对 Fr 1C2-4 进 行 分 离, Fr 1C2 ( 14. 3 g) 经 反 相 硅 胶 柱 甲 醇-水 ( 2 ∶ 3､3 ∶ 2､ 4 ∶ 1､1 ∶ 0) 梯度洗脱,得 Fr 1C2-1-C2-4,Fr 1C3 ( 27. 4 g) 经 反 相 硅 胶 柱 甲 醇-水 ( 2 ∶ 3､3 ∶ 2､ 4 ∶ 1､1 ∶ 0) 梯度洗脱,得 Fr 1C3-1-C3-4｡Fr 1C4 ( 19. 1 g) ,经反相硅胶柱甲醇-水 ( 1 ∶ 1､4 ∶ 1) 梯度洗脱得 Fr 1C4-1-C4-2｡

Fr 1C2-2 ( 3. 5 g) 经正相硅胶柱石油醚-丙酮 ( 3 ∶ 1) ,Sephadex LH-20 甲醇-水 ( 4 ∶ 1) 洗脱得 化合物 2 ( 4. 1 mg) ; Fr 1C3-2 ( 5. 9 g) 经正相硅胶 柱石油醚-丙酮 ( 3 ∶ 1) ,得 Fr 1C3-2-1 ~ Fr 1C3-2-4, Fr 1C3-2-1经 Sephadex LH-20 甲醇-水 ( 4 ∶ 1) ,得 Fr 1C3-2-1-1 ~ Fr 1C3-2-1-25,Fr 1C3-2-1-12经半制备液相甲醇水 ( 2 ∶ 3) ,得化合物 3 ( 1. 8 mg) ､4 ( 2. 2 mg) ; Fr 1C4-1 ( 7. 0 g) 经正相硅胶柱石油醚-丙酮 ( 4 ∶ 1) ,得 Fr 1C4-1-1和 Fr 1C4-1-2,Fr 1C4-1-1 ( 0. 8 g) 和 Fr 1C4-1-2 ( 0. 56 g ) 经 Sephadex LH-20 甲 醇-水 ( 4 ∶ 1) ,得 Fr 1C4-1-1-1､Fr 1C4-1-1-2､Fr 1C4-1-1-3､Fr 1C4-1-2-1和 Fr 1C4-1-2-2,Fr 1C4-1-1-1经半制备液相甲醇水 ( 3 ∶ 7) ,得化合物 5 ( 2. 3 mg) ,Fr 1C4-1-2-1经 半制备 液 相 甲 醇-水 ( 1 ∶ 4) ,得 化 合 物 6 ( 3. 1 mg) ,Fr1C4-2 ( 10. 3 g ) 经反相硅胶柱甲醇-水 ( 2 ∶ 3､3 ∶ 2､4 ∶ 1､1 ∶ 0) 梯度洗脱,得 4 个亚 组分 Fr1C4-2-1-Fr1C4-2-4,Fr1C4-2-2经半制备液相甲醇水 ( 2 ∶ 3) 得化合物 7 ( 5. 3 mg) ､8 ( 11. 6 mg) , Fr1C4-2-3经半制备液相甲醇-水 ( 9 ∶ 11) 得化合物 9 ( 1. 5 mg) ､10 ( 0. 72 mg) ｡

化合物 1: 白色针羽状结晶,可溶于 95% 乙 醇､丙酮,不溶于水,与 β-谷甾醇标准品薄层色 谱比较,多种展开系统下两者均具有相同的 Rf 值;与 β-谷甾醇红外光谱比较,特征吸收峰均相同[9], 故鉴定为 β-谷甾醇｡