优选咳喘合剂的提取工艺-昆山舒美KQ-500D使用

咳喘合剂是杭州市红十字会医院的临床经验 方，由蜜麻黄、蜜款冬花、蜜紫菀、浙贝、黄芩、前胡、 甘草等 12 味中药组成，具有宣肺平喘，止咳化痰的 功效，临床用于小儿急慢性支气管炎、哮喘、过敏性 咳嗽及上呼吸道感染、感冒后痒咳等症。为了规范咳 喘合剂的提取工艺，确保制剂的疗效，根据处方中药 物各组分的理化性质及药理特点，结合中医临床用 药经验，采用正交实验法对咳喘合剂进行了提取工 艺的优选研究，为咳喘合剂的制备提供依据。

1 实验材料

1.1 仪 器

AL204 型电子分析天平(梅特勒-托利 多仪器（上海）有限公司)；R502B 型旋转蒸发仪（上 海申胜生物技术有限公司）；SHB-Ⅲ-A 型循环水式 真空泵（杭州大卫科教仪器有限公司）；HH6 型恒温 水浴锅（金坛市江南仪器厂）；2F-1 型电热鼓风干燥 箱（上海一恒科学仪器有限公司）；昆山舒美KQ-500DB 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；U3000 型 美国戴安液相色谱（戴安中国有限公司）。

1.2 试 药

咳喘合剂（批号 180711）；饮片：丹参 （批号 171108），甘草（批号 170717），蜜紫菀（批号 171221），黄 芩 （批 号 171112）， 桑 白 皮 （批 号 171225），燀苦杏仁（批号 170305），蜜款冬花（批号 180615），焦六神曲 （批号 180529），前胡 （批号 180323），浙贝母（批号 180328），炒紫苏子（批号 161013），均来自浙江惠松制药有限公司；黄芩苷对 照品 （中国食品药品检定研究院，批号 110715- 201720，纯度 93.5%），甲醇、磷酸均为色谱纯，水为 超纯水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 黄芩苷

HPLC 含量测定方法的建立

2.1.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18 （4.6mm×250mm，5μm）；柱温：25℃;检测波长：280nm；流速: 1.0mL/min；流动相：甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）；进样 量：10μL。

2.1.2 溶液制备

对照品溶液的制备：称取黄芩苷 对 照 品 适 量 ， 精 密 称 定 ， 加 甲 醇 制 成 浓 度 为 0.01857mg/mL 的黄芩苷对照品溶液。供试品溶液的 制备：精密量取本品 5mL，置 100mL 容量瓶中，加 70%乙醇适量超声处理（250W，40kHz）30min，放冷， 定容至刻度，摇匀，精密量取续滤液 1mL 置 10mL 量 瓶中，加 70%乙醇至刻度，摇匀，经 0.45un 的微孔滤 膜滤过，取续滤液，即得。

2.1.3 方法学考察

2.1.3.1 专属性试验

按咳喘合剂处方比例及工艺， 同法制成不含黄芩的阴性样品，精密吸取黄芩苷对 照品、供试品及阴性样品溶液各 10μL，按“2.1.1”项 下色谱条件进样。结果表明阴性样品溶液无干扰，方 法专属性良好。见图 1-3。

2.1.3.2 线性关系考察

精密吸取“2.1.2”项下黄芩 苷照品溶液。逐级稀释共得 5 份对照品溶液系列，浓 度依次为：0.01857μg/mL、0.09285μg/mL、0.14856μg/mL、 0.18570μg/mL、0.22284μg/mL，在“2.1.1”项色谱条件 下，分别精密吸取上述对照品溶 10μL 注入液相色谱 仪。以峰面积（Y）对浓度（μg/mL，X）线性回归，回归 方程：Y=3，502.536X-3.380，相关系数：R2 =1.000，在 0.01857～0.22284mg/mL 范围内，对照品的峰面积与 进样浓度有良好的线性关系。

2.1.3.3 精密度实验

精密吸取“2.1.2”项下黄芩苷 对照品溶液，重复进样 5 次，按“2.1.1”项下色谱条件 测定，测定黄芩苷 RSD 为 0.21%（n=6），表明仪器精 密度良好。

2.1.3.4 稳定性考察

取咳喘合剂（批号 180711）， 按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，于 0，2，4，8， 12，24h，按“2.1.1”项下色谱条件测定，黄芩苷 RSD 为 0.46%（n=6），表明供试品溶液在 24h 内基本稳 定。

2.1.3.5 重复性试验

取同一供试品咳喘合剂（批号 180711），按“2.1.2”项下的方法，制备 6 份供试品溶 液，按“2.1.1”项下色谱条件测定。结果表明，以黄芩 苷为参照峰，各共有峰相对保留时间 RSD<1.34%，表 明方法重复性良好。

2.1.3.6 加样回收率试验

取同一供试品咳喘合剂 （批号：180711），按“2.1.2”项下的方法，制备 6 份供 试品溶液，分别加入一定量黄芩苷对照品，按“2.1.1” 项下色谱条件测定。计算得平均回收率为 100.73%， RSD 为 1.38%（n=6），加样回收率良好。

2.2 出膏率的测定精密量取各实验的咳喘合剂

煎液适量置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干， 于 105℃干燥 3h，取出，置干燥器中冷却 30min，迅速 精密称定重量，计算出膏率。

2.3 正交实验设计

按处方比例称取蜜麻黄、蜜 款冬花、蜜紫菀、浙贝、黄芩、前胡、甘草等药材共 9份，每份 106g，在预实验基础上，选取煎煮次数、加水 量、煎煮时间和煎煮温度进行考察。

3 讨 论

咳喘方原为草药的水煎方，对小儿咳喘在临床 上已取得良好的疗效。中药合剂可发挥中药的综合 作用，吸收快、奏效迅速、可批量生产；既保留传统汤 剂起效快的特点，又克服其服用、携带不便的缺点， 省去临时配方和煎煮的麻烦，同时改善口感。咳喘合 剂的制备选用水作为提取溶剂，可以最大程度保留 原汤剂的煎药方式，同时还可以避免物质基础发生改变的风险。



 

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