浅谈野菊花水提物抗抑郁作用

抑郁症的发病机制有多种假说，多年来一直公认 的是单胺学说 ，后来又提出神经营养假说 ，近年 来发现炎症也参与抑郁症的发病过程，有研究报道非甾体类抗炎药具有抗抑郁作用，故推测抗炎治 疗对抑郁症的治疗是有益的。野菊花为菊科植物野 菊 Chrysanthemum indicum L. 的干燥头状花序，具有 清热解毒之功效 。现代药理研究表明，野菊花具有广谱抗菌、解热、保肝、保护心血管、调节免 疫、抗血小板聚集、抗肿瘤、抗炎、神经保护等药 理作用，但尚无关于野菊花抗抑郁作用方面的相关 报道。本研究拟通过小鼠抑郁模型探讨野菊花水提 物的抗抑郁作用及相关药理机制。

1 材料与方法

1.1 动物

雄性昆明（KM）小鼠，SPF 级，体质量 （20±2）g，由山东省实验动物中心提供，动物许可证 号：SCXK（鲁）2013-0001。实验过程中小鼠自由饮水、摄食，适应性喂养 5 d 后开始进行实验。

1.2 药物及主要试剂

野菊花购自张仲景大药房，产 地河南，批号：141001CP0560，经本校药学院陈随 清教授鉴定为菊科植物野菊 Chrysanthemum indicum L. 的干燥头状花序。盐酸氟西汀，购自常州四药制 药有限公司，批号：201401141。5-羟色胺（5-HT）、 去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）酶联免疫反应 （ELISA）试剂盒，批号：E20160426A；小鼠环氧合 酶-2（COX-2）、前列腺素 E（2 PGE2）、白细胞介素-1β （IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）酶联免疫反应试剂盒 （批号：E20160309A）及脑源性神经营养因子（BDNF） 酶联免疫反应试剂盒（批号：E20160318A），均购自 河南天驰生物技术有限公司。

1.3 主要仪器

ZZ-6 型小鼠自主活动测试仪，成都 泰盟科技有限公司；KQ3200DE型超声波清洗器，昆山舒美超声仪器有限公司；悬尾实验箱，自制，40 cm× 40 cm×40 cm；游泳圆形玻璃容器，高 20 cm，直径 18 cm；ELx800 型酶标仪，美国 Biotek 公司； FS-21 型数码摄像机，日本佳能公司。

1.4 野菊花水提物的制备

野菊花打粉，过 40 目 筛，称定质量，加 10 倍量纯净水（m∶V=1∶10），浸泡 30 min，超声波提取 30 min 后过滤，将过滤液于旋蒸仪中浓缩，药液浓度配制成 1 g·mL- （1 以生药量 计）。小鼠灌胃给药时将野菊花水提物用纯水稀释至 所需浓度。

1.5 小鼠强迫游泳试验

正常小鼠随机分为 6 组， 每组 10 只，即正常组（不游泳不给药，在“1.8”项 下检测中作为对照），模型组（只游泳不给药），氟西 汀组（阳性对照药，0.02 g·kg-1 ），野菊花水提物低、 中、高剂量组（2、4、8 g·kg-1 ，相当于 70 kg 成人等 效剂量的 1、2、4 倍）。每天上午 8 点灌胃给药，每 日 1 次，连续给药 8 d，末次给药 1 h 后，进行行为 学观察。将小鼠单个放入水深 10 cm、水温 25 ℃的 圆形玻璃容器中（高 20 cm，直径 18 cm）。记录 6 min 内小鼠的活动状态，并计算后 4 min 内小鼠的不 动时间。

2 结果

与模型组比较，氟西汀组能显著缩短小鼠强迫 游泳不动时间和悬尾不动时间，差异均具有统计学 意义（P < 0.001），表明成功造模；野菊花水提物各 剂量组均能不同程度缩短小鼠悬尾不动时间和强迫 游泳不动时间，其中野菊花水提物中、高剂量组与 模型组的差异有统计学意义（P < 0.001）。表明野菊 花水提物中、高剂量组有明显的抗抑郁作用。与正常组 比较，氟西汀组和野菊花水提物各剂量组对小鼠的 自主活动均无明显影响，差异均无统计学意义（P > 0.05），表明氟西汀和野菊花水提物在本研究剂量范 围内无中枢兴奋作用。提示野菊花水提物对小鼠自 主活动没有明显影响，排除了由于自主活动性可能 带来的假阳性结果。与模型组比较，氟西 汀组能显著增加小鼠海马组织中 5-HT、NE、DA 的 含量，差异有统计学意义（P < 0.05，P < 0.01）；野菊花水提物中、高剂量组亦可显著提高小鼠海马组 织中 5-HT、NE 的含量，差异具有统计学意义（P < 0.05）；野菊花水提物各剂量组对小鼠海马组织中 DA 的含量没有明显影响，差异无统计学意义（P > 0.05）。表明野菊花水提物中、高剂量可以提高小鼠 海马组织中 5-HT、NE 的水平，而对 DA 水平没有明 显影响。与模型组比较，氟西汀组以及野菊花水 提物中、高剂量组均能显著增加小鼠海马组织中 BDNF 的含量，差异均具有统计学意义（P < 0.05）。 表明野菊花水提物中、高剂量组可以提高小鼠海马组织中BDNF的水平。

3 讨论

抑郁症患者的临床表现复杂多样，易受到内外环 境等多种因素的影响，病情容易反复发作，缠绵难 愈，需长期服药，然而目前常用的抗抑郁药长期应 用易产生不良反应，因此从天然药物中筛选具有抗 抑郁活性的成分具有积极意义。本研究采用小鼠悬 尾试验和强迫游泳试验的抑郁症模型，探讨了天然 药物野菊花水提物的抗抑郁效果，结果表明野菊花水提物具有明显的抗抑郁作用。在行为绝望模型中，一些具有中枢兴奋作用的药 物可能导致出现假阳性结果，因此在筛选抗抑郁药 物时需要排除这种假阳性结果的可能性。本实验采 用小鼠自主活动测试仪来观察小鼠的自主活动，结果显示野菊花水提物对小鼠自主活动无明显影响， 表明野菊花水提物在本研究剂量范围内无中枢兴奋 作用。