果皮和果肉中酚类中的分析

八月瓜（Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz.）为木通 科木通属落叶藤本植物，其果实又称木通子、八月扎、 八月炸、预知子等，是一种集药用、食用于一身的野生 经济植物，分布于我国南部、长江流域和西北地区。 八月瓜果实、叶、种子和根中富含糖、维生素、矿物质、 有机酸、氨基酸、油脂、木质素、多酚、黄酮及抗衰老等 成分，可鲜食，也可酿酒、制醋、加工成果脯等食品。 民间多用于治疗小便赤涩、淋浊水肿、胸中烦热、喉痹 咽痛、遍身拘痛、妇女经闭、乳汁不通等疾病。

八月瓜叶和果实采自贵州省遵义县沙湾镇八一 村，经贵阳学院副教授杨碧仙鉴定为木通科木通属植 物三叶木通 Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz.的叶和果实，将八月瓜贮藏于 4 ℃采样箱运回贵州省果品加工工程技术研究中心实验室，果肉和果皮分离，果肉去 籽后，-80 ℃超低温冰箱保存备用。 没食子酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、p-香豆酸、 阿魏酸、鞣花酸、芦丁和槲皮素（9 种酚类分析标准品，纯 度≥95.0 %）、甲醇、三氟乙酸（色谱纯，纯度≥99.5 %）： 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；抗坏血酸、三氯 乙酸（trichloroacetic acid，TCA）分析纯、福林酚（FolinCiocalteu）试剂：上海聚源生物科技有限公司；Trolox 试 剂、三吡啶三吖嗪 （tripyridyltriazine，TPTZ）、2，2-联 氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐 [2，2-azinobis（3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid）diammoni－ um salt，ABTS]：美国 Sigma 公司。其他试剂均为国产分 析纯。

LC-20A 高效液相色谱仪、UV-2550 型紫外分光 光度计：日本岛津公司；KQ5200DE 超声清洗器：昆山市超声仪器有限公司；IKA A11 研磨机：IKA 公司 （德 国）；C18 色谱柱 （250 mm×4.6 mm，5 μm）：Waters 公司 （中国上海）。

称取 10 g 样品研磨成浆，取 2 g 果浆于 10 mL 离 心管中，加入 4.0 mL 70 % 甲醇溶液，50 ℃超声波辅助 提取 30 min，冷却后 10 000 r/min 离心 15 min，将上清 液过滤到 10 mL 的容量瓶中，加入 3.0 mL 70 %甲醇溶 液于残渣中再提取 30 min，在 4 ℃、12 000 r/min 离心 10 min，合并上清液，用 70 %甲醇溶液定容，用 0.45 μm 的滤膜过滤后待测，取 1.0 mL 转移至进样瓶中等待进 样，每个样品 3 次重复。

准确称取 9 种酚类物质标准品各 10.00 mg，用甲 醇溶解并定容至 10.0 mL，配制成 1.00 mg/mL 的酚类物质标准品贮备液，保存于-4 ℃冰箱备用。

9 种多酚化合 物的标准品得到了较好的分离 （图 1A），野生八月瓜 叶、果皮和果肉样品溶液色谱图（图 B、C、D）中的 9 个 目标峰，其保留时间与标准品溶液的 9 个色谱峰保留 时间一致。在此色谱条件下，八月瓜叶、果皮和果肉中 的酚类成分得到较好的分离。八月瓜叶、果皮和果肉中各成分含量差 异显著 （P＜0.05），各部位活性成分含量大小顺序为： 叶>果皮>果肉，其中叶中没食子酸、儿茶素、p-香豆 酸、阿魏酸、鞣花酸、芦丁、槲皮素、抗坏血酸和总酚含 量相对较高，其中没食子酸含量 （[ 715.64±4.69）μg/g Fw]是果皮、果肉的 6 倍和 12 倍；儿茶素含量（[ 9.16± 0.41）μg/g Fw]是果皮、果肉的 3 倍和 17 倍；p-香豆酸 含量（[ 0.6±0.06）μg/g Fw]是果皮的 7.5 倍，果肉中未检 测到；阿魏酸含量（[ 7.88±0.43）μg/g Fw]是果皮、果肉的 1.3 倍和 88 倍；鞣花酸含量（[ 147.61±0.87）μg/g Fw]是 果皮、果肉的 12 倍和 9 倍；芦丁在叶中含量（[ 50.24± 1.53）μg/g Fw]是果皮和果肉的 10 倍，芦丁在果肉和果 皮中的含量差异不显著（P＞0.05）；槲皮素含量（[ 27.36± 0.77）μg/g Fw]是果皮、果肉的 6 倍和 9 倍；抗坏血酸含 量（[ 200.12±0.23）mg/100 g FW]是果皮、果肉的 7 倍和 81 倍；总酚（[ 3.44±0.11）mg/g FW]含量是果皮、果肉的 1.3 倍和 43 倍。而果皮中绿原酸和表儿茶素含量相对 较高，其中绿原酸含量（[ 52.82±0.71）μg/g Fw]是叶、果 肉 1.2 倍和 123 倍；表儿茶素含量 （[ 1.08±0.10）μg/g Fw]是叶、果肉 3 倍和 18 倍。八月瓜叶和果皮中总黄酮 含量差异不显著（P＞0.05），叶和果皮中总黄酮含量是 果肉（[ 0.19±0.00）μg/g Fw]的 24 倍。综上所述，八月瓜 除了可食用部分果肉，其叶和茎均含有较高的活性物 质且不同部位间存在显著差异。

邵显会分析了三叶木通不同部位总黄酮含量，发 现黄酮含量从高到低依次是根（5.72 %）＞叶（4.5 %）＞果 皮（2.0 %）＞果肉（0.2 %），张孟琴等分析了三叶木通 果皮黄酮含量（2.32 %），本研究发现不同部位黄酮含 量的总体趋势和邵显会等研究一致，但含量显著低于 邵显会和张孟琴等报道，且总黄酮在果皮和叶中含量 差异不显著；欧阳玉祝等用离子沉淀法分离了果皮 中总多酚，总多酚提取率为 5.103 7 %，顾仁勇等响应 面优化超临界 CO2 萃取八月瓜幼果多酚，八月瓜幼果 多酚萃取得率可达 6.41 %，本研究发现八月瓜不同部 位多酚含量的总体趋势与陆俊等的研究一致，但含量 显著低于文献报道，发现 VC、黄 酮含量、总酚含量和个别酚类成分与抗氧化能力间有 显著相关性，因此八月瓜不同部位的抗氧化能力不 一，且叶和果皮的抗氧化能力显著高于果肉，可考虑 作为天然抗氧化剂，用于美容护肤品、植物酚类保健 品或者防止心脑血管疾病药物的开发。