新疆紫草中总萘醌提取方法的比较

紫草 （Arnebia euchroma） 为我国传统常用中 药，始载于《神农本草经》，列为中品，多用于湿 疹、水火烫伤、麻疹不透等症。临床上常用于治疗 皮肤病、慢性肾炎、烧烫伤、静脉炎等。《中国药 典》2015 年版规定，紫草为新疆紫草（Arnebia eu－ chroma（Royle）Johnst）或内蒙紫草（Arnebia. guttata Bunge）的干燥根，其中，以新疆紫草质量较优。研 究表明，新疆紫草含有多种活性成分，主要包括萘 醌类、生物碱、黄酮类、有机酸及多糖等；具有广 泛的抗病毒作用、抗氧化活性、免疫调节及抗肿瘤 活性；以紫草素为代表的萘醌类成分为其主要 活性成分。

目前，紫草中总萘醌类成分的提取方法有超临 界 CO2 萃取法、超声提取法、溶剂浸提法、减压蒸馏 法等。但是各种方法之间的提取效率、有效成分的 稳定性等方面存在差异。

为了筛选新疆紫草中总萘醌类化合物较为理 想的提取方法，本研究对回流提取法、渗漉提取法、 超声提取法进行了比较研究。

UV-1800 紫外 - 可见分光光度仪（日本岛津公司），Secura324-1CN 电子分析天平（赛多利斯），HH-S4 数显恒温水浴锅（金坛市医疗器械厂），KQ-1000E落地式超声波清洗机（昆山舒美超声仪器有限公司）；电热恒温干燥箱、旋转蒸发仪、恒温水浴锅（上海百典 仪器有限公司）。

供试新疆紫草购自山西省药材公司，并经鉴定 为 Arnebia euchroma（Royel）Johnst。左旋紫草素对 照品购自中国药品生物制品检定所，其余所用试剂 均为分析纯。

1.3.2.1 回流提取法 称取粗粉 50.00 g，60 ℃分别加 8 倍和 6 倍 95%乙醇回流 2 次，时间分别为 2，1 h， 合并提取液，回收乙醇至浸膏状，冷冻干燥，得干 膏备用。

1.3.2.2 渗漉提取法 称取粗粉 50. 00 g，加 8 倍量 95%乙醇浸泡过夜，以 1 mL/min 流速进行渗漉，回 收乙醇至浸膏状，冷冻干燥，得干膏，备用。

1.3.2.3 超声提取法 称取粗粉 50.00 g，分别加 8 倍 和 6 倍 95%乙醇超声 2 次，每次 30 min，合并提取 液，回收乙醇至浸膏状，冷冻干燥，得干膏备用。

1.3.3 标准曲线制备 精密称取左旋紫草素对照 品 2.5 mg，置于 50 mL 容量瓶中，无水乙醇溶解定 容，即得质量浓度为 0.05 mg/mL 的对照品溶液。

分别精密量取对照品液 1，2，3，4，5 mL 置于 10 mL 容量瓶中，无水乙醇定容。采用紫外 - 可见 分光光度法，在 516 nm 处测定吸光度。

精密称量不同提取方法 获得的干膏 0.05 g，置 50 mL 容量瓶中，无水乙醇定 容，溶解过滤。量取滤液 5 mL，置 25 mL 容量瓶中， 无水乙醇定容，摇匀，即得样品供试液。精密吸取上 述样品供试液 1 mL，在线性关系下测定吸光度，并 计算出样品中总萘醌的含量。

选择总萘醌类得率最高的方 法，同时制取 5 份样品溶液，连续测定其吸光度，计 算 RSD，考量其精密度。

选择总萘醌类得率最高的方 法，精密量取样品溶液 1 mL，每隔 30 min 重复测定 总萘醌含量，连续 5 h，计算 RSD，考察其不同时间 点的稳定性。

2.1 标准曲线制备 以吸光度（A） 为纵坐标，左旋紫草素对照品 （C）质量浓度（mg/mL）为横坐标进行回归分析，得 标准曲线方程为：A＝25.092 4C－0.004 1，r＝0.999 6， 在 5～25 mg/L 质量浓度范围内，二者的线性关系 良好。

2.2 不同提取方法总浸膏得率及总萘醌含量比较 由表 1 可知，在 3 种方法中，总萘醌含量从大 到小依次为超声提取法、回流提取法、渗漉提取法。

2.3 精密度试验分析 采用超声提取法提取 5 份样品溶液，以吸光度 计算，RSD 为 2.61%，说明精密度良好。

2.4 稳定性试验分析 采用超声提取法，每隔 30 min 连续 5 h 重复测 定总萘醌含量，其 RSD 为 1.86%，说明提取液在 5 h 内稳定性良好。

紫草中总萘醌类成分脂溶性强，易溶于石油 醚、氯仿等有机溶剂，可溶于乙醇，微溶于水。在 测试过程发现，回流提取法在提取过程中，有效成 分损失较大。这与萘醌类成分不稳定，对光、热等敏 感，其稳定性受温度影响较大有关。

渗漉提取法的总浸膏得率最高，超声提取法的 总萘醌含量最高。采用渗漉提取法，虽然总萘醌类 成分不是最高，但总浸膏得率较高。综合比较，渗漉 法作为紫草中总萘醌类成分初始提取方法，可以有 效节约能源，且具有设备要求低、操作简便等优点， 较适用于工业化量产。

相对于传统的提取方法，超声提取法获得的总 萘醌类成分含量最高，研究表明，超声波法无需加 热、加压，可以缩短提取时间，降低成本，提高生产 效率，但对设备要求较高。目前，虽然渗漉提取法 在工业化中使用较为普遍，但由于超声提取法在减 少有机溶剂使用、降低环境污染等方面的优势，决 定其在未来工业化方面具有广阔的应用前景。因 此，超声法提取紫草有效成分的工艺条件值得进一 步研究。