人体营养状况评价指标标志物的实验室生化 检测是人体营养状况评价必不可少的内容,其 对营养素缺乏的早期诊断及干预有重要意义。人 体铁缺乏是人体营养素缺乏中常见的类型,其缺 乏导致的缺铁性贫血是全球性的重要营养问题之 一,目前评估机体铁状况的常用指标是血清铁 蛋白和可溶性转铁蛋白受体,同时选用 SF、 sTfR 两项指标可较为全面地相互映证机体铁水平。MAGPIX 液态悬浮芯片 检测仪 ( MAGPIX16103701,美国 Millipore 公司) ,高速台 式离心机( 5418,德国 Eppendorf 公司) ,旋涡混匀 器( ORTEX Genius,德国 IKA 公司) ,数控超声波 清洗器( KQ5200DE,昆山市超声仪器有限公司) , 多功能高速台式冷冻离心机( Allegra X-22R,美国 贝克曼公司) ,磁力洗板器( 171020100,美国 BioPlex 公司) ,微孔板振荡器( 4625-1CEM) 、磁力架 ( DvnaMag-2,美国 Thermo fisher 公司) 。
商用稀释液、1%BSA、PBS 三者作为稀释液, 效果略有差异,对于 SF、sTfR、CRP,3 种稀释液效 果差异无统计学意义,提示 1%BSA、PBS 具有对 商用稀释液的替代性; 对于 RBP4,1%BSA 和 PBS 则明显优于商用稀释液,说明 1%BSA 和 PBS 作 为稀释液可以替代商用稀释液并取得更好的实验 效果。较宽的线性范围,即高浓度 蛋白与低浓度蛋白信号值的差距越大越好,可用 倍数关系比较; 第二,较低的背景值,可用阳性值 与背景值的倍数关系表示; 第三,选定组合对应的 低浓度信号值均值-2SD 应明显大于空白值均值+ 2SD。通过以上筛选标准,确定了 4 种蛋白的抗 体最佳浓度组合,为后期交叉实验中捕获抗体和 检测抗体浓度的选择提供了依据。