滇桂艾纳香分析（昆山舒美KQ-500E）

1 材料 

1.1 仪器 

Agilent 1100型高效液相色谱仪（安捷伦公 司）；XP205型电子天平（1/10万，梅特勒公 司）；Milli-Q超纯水机（Millipore公司）；KQ500E型医用数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；PCR仪（ABI VERITI）；MM400球 磨仪（Retsch公司）；微量紫外分光光度计（Nano Value）；EPS-301电泳仪（Amersham公司）；全 自动凝胶成像系统（Syngene公司）。 

1.2 对照品 

绿原酸（批号110753-201314）、3,5-O-二 咖啡酰基奎宁酸（批号111782-201807）和4,5-O二咖啡酰基奎宁酸（批号111894-201102）由中国 食品药品检定研究院提供；新绿原酸（批号NCA658144）、隐绿原酸（批号CCA-658288）和3,4- O-二咖啡酰基奎宁酸（批号DCA-250224）由成都 曼思特生物科技有限公司提供；1,3,5-O-三咖啡酰 基奎宁酸（批号TCK-662510）由上海诗丹德标准 技术服务有限公司提供。以上对照品经HPLC-DAD （面积归一化法）检测纯度均大于98.0%。

1.3 试剂 

乙腈（色谱纯，Fisher公司）；磷酸、甲 醇（分析纯，国药集团化学试剂公司）；植 物基因组DNA提取试剂盒（Plant Genomic DNAkit，TIANGEN）；2×Taq Master Mix缓冲液 （GK8006，GENEray）；ExRed（ZS203-1， 庒盟生物）；琼脂糖（50002，Lonza）；ITS2 引物（上海捷瑞生物工程有限公司，ITS2F:5'- ATGCGATACTTGGTGTGAAT-3'；ITS3R:5'-GACG CTCTCCAGACTACAAT-3'）。

1.4 样品 

6批滇桂艾纳香、7批东风草、3批高艾纳香均 由本课题组野外采集；同时制作相应的腊叶标本送 广西中医研究院，由黄云峰副研究员鉴定为滇桂艾 纳香B.riparia、东风草B.megacephala.、高艾纳香 B.repanda。1

2 基原鉴定及生药学鉴别

滇桂艾纳香腊叶标本于2018年3月19日采自广 西百色市右江区大王岭，为攀援状草质藤本。茎圆柱形，叶无柄，叶片卵状长圆形，边缘有疏生的点 状细齿，两面无毛或被疏柔毛。头状花序多数， 径5～8 mm，在腋生枝顶端排列成密圆锥花序，多 数小圆锥花序再排列成具叶的大圆锥花序，有长 5～10 mm的花序柄；总苞钟形或圆柱形。东风草标本于2018年3月21日采自贵州省兴义 市万峰湖，攀援状草质藤本或基部木质。茎圆柱 形，叶片卵形，边缘有疏细齿，下面无毛或多少被疏毛。头状花序疏散，直径1.5～2 cm，通常1～7 个在腋生小枝顶端排列成总状或近伞房状花序，再 排成大型具叶的圆锥花序；花序柄长1～3 cm；总 苞半球形。

3 薄层鉴别 

按滇桂艾纳香现行质量标准中的薄层鉴别方 法对滇桂艾纳香、东风草及高艾纳香进行对比试 验，结果发现，三者均具有相同的一个主斑点，表 明现行质量标准的方法缺乏专属性，需要对其薄层 方法进行更深入的研究。研究结果建立了两个自拟 方法，方法一是基于滇桂艾纳香中的主要成分（咖 啡酰基奎宁酸类）建立的，该方法可将高艾纳香与 滇桂艾纳香、东风草区别开；鉴于方法一未能有效 区分滇桂艾纳香及东风草，通过更换展开条件和显 色方法建立了方法二，该方法可将三者区分开，专属性较强。

免责声明：文章仅供学习和交流，如涉及作品版权问题需要我方删除，请联系我们，我们会在第一时间进行处理。