飞龙掌血中红碱含量变化的影响分析（KQ5200B使用

飞龙掌血为芸香科飞龙掌血属植物飞龙掌血 （Toddalia asiatica Lam.）的根或根皮，又名黄椒根、 血莲肠、血见飞、血见愁、大救驾（贵州）、三百棒（湖 南、湖北、陕西）、散血丹（广西），为中国传统民族 药 ，主产于广西、广东及贵州等地，具有活血化瘀、 止痛、止血、驱风除湿之功效 。药理学研究表明， 该药具有镇痛、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤及抗血 小板聚集的作用；临床上也常用于治疗跌打损伤、 风湿性关节炎、多种痛症和出血症 。

1 仪器与试药 

1. 1 仪器

Agilent 1260 型超高效液相色谱系统、Lambda265 型 PDA 紫外检测器，美国安捷伦有限公司； DHG-9240A型电热鼓风干燥箱，上海一恒科学实验 仪器有限公司；Milli-Q Advantage A10型纯水仪，美 国密理博超纯水系统；SQP电子天平，赛多利斯（上 海）科学仪器有限公司；昆山舒美KQ5200B型超声波清洗器， 昆山市超声仪器有限公司；DFY-300C 型摇摆式高 速粉碎机，温岭市林大机械有限公司；H1650-W 型 离心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司。

1. 2 试药

黄酒（酒精度：7.12%），浙江越龙山绍兴酒股份 有限公司酿造；甲醇、磷酸（分析纯），国药集团化学 试剂有限公司；乙腈（色谱纯），德国赛默飞世尔科 技有限公司。 飞龙掌血根皮对照药材（批号为121410-200701）、 白屈菜红碱对照品（批号为 111718-201402），均为 中国食品药品检定研究院。 飞龙掌血药材采购于广西来宾市金秀镇瑶都 广场药材街，经广西中医药大学韦松基教授鉴定为 芸香科飞龙掌血属植物飞龙掌血T. asiatica Lam.的 根。

2 方法与结果

2. 1 药材炮制加工

炮制加工方法以2015年版《中华人民共和国药 典》 炮制通则中记载的方法为基础，结合实际情 况改良而成，具体炮制方法如下。 水洗法：称取大小分档后飞龙掌血药材10 g，平 行取3份，分别投入足量自来水中快速清洗，至药材 表面浸润无泥沙后取出，置60℃恒温鼓风干燥箱内 干燥，干燥后打粉过筛，标签备用。即得飞龙掌血水洗炮制品。 水煮法：称取大小分档后飞龙掌血药材10 g，平 行取3份，分别置不锈钢锅内，加自来水至刚浸没药 材为度，文火加热，煮至药材变软内无干心时取出， 置 60℃恒温鼓风干燥箱内干燥，干燥后打粉过筛， 标签备用。即得飞龙掌血水煮炮制品。 水蒸法：称取大小分档后飞龙掌血药材10 g，平 行取3份，分别置不锈钢蒸锅内，加足量自来水后， 隔水加热，待武火加热至水沸后改文火加热，蒸至 药材变软色泽暗淡时取出，置60℃恒温鼓风干燥箱 内干燥，干燥后打粉过筛，标签备用。即得飞龙掌 血水蒸炮制品。 酒蒸法：称取大小分档后飞龙掌血药材10 g，平 行取3份，分别置不锈钢蒸锅内，加入适量黄酒后， 隔酒文火加热，蒸至药材变软色泽暗淡时取出，置 60℃恒温鼓风干燥箱内干燥，干燥后打粉过筛，标签 备用。即得飞龙掌血酒蒸炮制品。 酒炙法：称取大小分档后飞龙掌血药材10 g，平 行取3份，分别加适量黄酒与药材拌匀闷润，待酒被 吸尽后，用文火炒至药材表面微干，呈暗棕色，略带 焦斑时，取出晾凉，筛去灰屑后打粉过筛，标签备 用。即得飞龙掌血酒炙炮制品。

2. 2 含量测定方法

2. 2. 1 对照品溶液的制备

精密称取白屈菜红碱 对照品0.74 mg，加甲醇定容至25 ml容量瓶，作为标 准对照品储备液，备用。

2. 2. 2 供试品溶液制备

称取药材粉末和对照药 材粉末各 0.2 g，精密称定，置 50 ml 锥形瓶中，加甲 醇 10 ml，称定，超声提取 30 min，冷却至室温并补 重，摇匀，过滤，取续滤液至1.5 ml离心管中，14 465.5×g 离心10 min，吸取上清液备用。

2. 2. 3 色谱条件

色谱柱：Agilent TC-C18（250 mm× 4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-1%磷酸水溶液 （B）；梯度洗脱：0～30 min，30%B；35～45 min，30% B～45% B；45～50 min，45%B；50～51min，45% B～ 15% B；流速：1.0 ml/min；检测波长：320 nm；柱温： 30℃；进样量：10 μl。柱效以白屈菜红碱峰计算，理 论塔板数不＜5000。 在此色谱条件下，对照品溶液、对照药材溶液 及药材生品溶液进行测定，见图1；谱图1A显示，白 屈菜红碱对照品色谱峰峰型较好，保留时间为 36.879 min；谱图1B飞龙掌血对照药材色谱图显示 白屈菜红碱色谱峰峰型良好，保留时间是 36.765min，分离度2.62＞1.5，完全分离；谱图1C飞龙掌血 药材生品色谱图显示白屈菜红碱色谱峰峰型良好，

 保留时间是 36.580 min，分离度 5.78＞1.5，完全分 离。

2. 2. 4 方法学考察

标准曲线与线性范围：量取 2. 2. 1项对照品母液1.0 ml分别置1、2、5、10和25 ml 容量瓶中，加甲醇定容至刻度线，按2. 2. 3项色谱条 件进行测定，以峰面积（y）为纵坐标，浓度（x）为横坐 标，得白屈菜红碱的回归方程 y=34.986x+15.421， （r 2 =0.9992），线性范围1.184～29.6 mg/L。 精密度：量取2. 2. 1项对照品母液1.0 ml置5 ml 容量瓶中，加甲醇定容至刻度线，按2. 2. 3项色谱条 件连续进样6次，测得白屈菜红碱峰面积的RSD为 2.61%（n=6），表明仪器的精密度良好。

3 讨论

本研究以飞龙掌血的功能主治和临床应用方 法为依据，通过研究水洗、水煮、水蒸、酒蒸、酒炙等 炮制方法对飞龙掌血中白屈菜红碱含量变化的影 响，明确了白屈菜红碱在不同炮制方法中的变化规 律，为飞龙掌血的炮制研究、临床应用开发提供了 一定参考依据。

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