测定如意金黄散中欧前胡素的含量（KQ2200E使用）

如意金黄散为中药复方制剂，外观为黄色至金 黄色的粉末，气微香，味苦、微甘。由大黄、白芷、黄 柏、天花粉等多味药组成，具有活血散瘀、消肿止 痛、抗炎灭菌之功效，可用于治疗静脉炎、儿童腮腺 炎、下肢丹毒等症，对糖尿病的并发症、肛肠性疾病的治疗亦有积极意义。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

LA-20AT 型高效液相色谱仪（日本岛津公司）； FA1604N 型电子天平 （南京信展科技有限公司）； 昆山舒美KQ2200E 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公 司）；TU-1810 型紫外可见分光光度计（北京普析通 用仪器有限责任公司）；DHG-9140A 型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。 欧前胡素 （中国药品生物制品鉴定所，批号 110826-201616）；乙腈、甲醇（色谱纯，国药集团化 学试剂有限公司）；二次蒸馏水；如意金黄散（江苏 707 天然制药有限公司）。

1.2 色谱条件

色谱柱：InertSustain C18（150mm×4.6mm，5μm）； 流动相：乙腈-水（48∶52，体积比）；流速：1.0mL·min-1 ； 检测波长：254nm；柱温：室温；进样量：20μL；光谱 扫描范围 220~500nm。理论塔板数按欧前胡素标准 品计算不低于 7700。

1.3 测定方法

1.3.1 对照品溶液的制备

精密称取经 P2O5 减压 干燥后的欧前胡素对照品 11.1mg，置于 100mL 的 棕色容量瓶中，加甲醇使之溶解，并定容至刻度，摇 匀，配得质量浓度为 111μg·mL-1 的对照品储备液。

1.3.2 供试品溶液的制备

取如意金黄散约 1g，精 密称定，加入甲醇 50mL，称重，室温下超声处理 30min，取出放冷，甲醇补足至原质量，过滤，弃去初 滤液，剩余滤液再经 0.45μm 微孔滤膜滤过，制得供 试品溶液备用。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 检测波长

取对照品溶液适量，在 220～ 500nm 波长范围内进行扫描，发现对照品溶液在 301nm 和 254nm 处有两个吸收峰。根据色谱图显 示，采用 254nm 作为检测波长，基线更稳定，干扰 少，分离度好，且有较高的峰面积和峰高值，故选择 254nm 作为检测波长。

2.1.2 流动相及流速选择

实验考察了 4 种流动 相系统即甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.3% H3PO4 溶液 以及甲醇-0.3% H3PO4 溶液，对 HPLC 分离效果的 影响。结果表明，选用乙腈-水（48∶52，体积比）为流 动相进行等度洗脱，所得色谱峰峰形良好，理论塔 板数较高。中药制剂如意金黄散的药味较多，成分复杂，因而吸收峰较多，选用 301nm 作为特征吸收 峰，发现有其它物质的干扰，故选择 254nm 作为检 测波长。流速的快慢选择对峰形及分析结果有一定 影响，选择低流速时色谱峰的分离效果好，但会导致 目标物出峰时间延长，实验通过对 （0.8、1.0、1.2mL· min- ）1 流动相流速的考察，确定最终流速为 1.0mL· min-1 。

2.1.3 专属性实验

取配制好的欧前胡素对照品 溶液和供试品溶液，按 1.2 色谱条件进样分析，记录 图谱。对照品图谱见图 1，供试品图谱见图 2。由图谱分析可知，供试品和对照品中欧前胡素 吸收峰的保留时间相同，且实验条件下欧前胡素与 其它组分分离完全。

2.2 线性关系考察

取 6 支 25mL 的容量瓶，分别精密移入对照品 储备液 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，用甲醇稀释并 定容至刻度。按 1.2 色谱分析条件进样，以欧前胡素 的质量浓度 C（μg·mL-1 )为横坐标，峰面积 Y 为纵坐 标，绘制标准曲线，见图 3。经线性拟合，得回归方程 为 Y=96089C+3509.5，r=1，表明欧前胡素的进样量 在 2.22~22.2μg·mL-1 浓度范围内具有良好的线性 关系。


3 结论

样品经甲醇提取，通过对色谱条件进行优化， 建立了高效液相色谱法测定中药制剂如意金黄散 中欧前胡素含量的色谱检测方法。该方法简便、可 靠、重复性及稳定性好，分离效果与专属性较强，能 为如意金黄散制剂的质量控制提供一定的依据。



 

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