效应面法优化芹菜籽挥发油羟丙基-KQ-250DE使用

芹菜籽为伞形科植物旱芹（Apium graveolens L.） 的干燥成熟果实。芹菜籽在维吾尔医药中广泛应 用，具有消除寒湿闭阴，消食健胃，消肿散气，消石 止痛，调和百药等功效，是新疆资源丰富的药食兼 用植物资源。芹菜籽中的挥发油是芹菜籽中的重要 成分，具有抗氧化、降低亚硝酸钠活性、降低血 液黏度、抗脑缺血、降血压等药理作用。

1 仪器与材料

1.1 仪器

SSI 型高效液相色谱仪 （美国实验仪器 公司）；Jade DSC 型差示扫描量热仪 （美国 Perkin Elmer 公司）；UV2450 型紫外分光光度计 （日本岛 津）；BT25S 型十万分之一分析天平 （赛多利斯科学 仪器有限公司）；KQ-250DE 型数控超声波清洗器 （昆山市舒美超声仪器有限公司）；UPT-Ⅱ-10T 型超纯 水器（四川优普超纯科技有限公司）；SOP 型电子天 平（赛多利斯科学仪器有限公司）；85-2 型数显恒温 磁力搅拌器（江苏中大仪器科技有限公司）；LGJ-10 型冷冻干燥机（北京松源华兴科技发展有限公司）； ZDHW 型调温电热套 （北京中兴伟业仪器有限公 司）；DK-98-Ⅱ型电热恒温水浴锅（天津泰斯特仪器 有限公司）；WZJ-681 型振动式药物超微粉碎机（济 南倍力 粉 技 术 工 程 有 限 公 司）；Five Eosy PlusTM FE20 型 pH 计 （METTLER TOLEDO）；TG16-WS 型 台式高速离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）。

1.2 试药

芹菜籽挥发油（实验室自制）；羟丙基β-环糊精（山东滨州智源生物科技有限公司）；中性蛋 白酶（江苏锐阳生物科技有限公司，200 000 U/g）；中 温 α淀粉酶（江苏锐阳生物科技有限公司，10 000 U/g）；丁苯酞对照品（批号 101035-201502，中国食品药品 检定研究院，含量以 99.6% 计）；甲醇（分析纯，天津 康科德科技有限公司）；乙腈（色谱纯，天津康科德 科技有限公司）；无水乙醇（分析纯，天津市科密欧 化学试剂有限公司）；乙酸乙酯（分析纯，天津市科 密欧化学试剂有限公司）；石油醚（分析纯，天津市 科密欧化学试剂有限公司）；去离子水（自制，优普 系列超纯水器）。

2 方法与结果

取芹菜籽适量，超微粉 碎机粉碎，过五号药典筛。然后取过筛后的芹菜籽 粉 300 g，置于圆底烧瓶中，加入 1 800 mL 去离子 水浸泡 30 min。加磷酸调节 pH 至 6.2，加入 6 g 复合 酶（中性蛋白酶：中温 α 淀粉酶=1∶1），混合均匀， 置 55 ℃水浴中酶解 2 h，然后采用水蒸气蒸馏法提 取 5 h，即得淡黄色透明的芹菜籽挥发油，提取率 为 2.336%。精密称取芹菜籽挥发油适 量于烧杯中，加适量的无水乙醇溶解；另取各实验 对应的羟丙基-β-环糊精于烧杯中，加 2 倍量的水溶 解。将羟丙基-β-环糊精溶液置于磁力搅拌器上，固 定转速，在各实验对应的恒定温度下逐滴加入挥发 油乙醇溶液，搅拌至规定时间，包合液以 2 000 r/min 的转速离心 2 min 后，吸去上层未包合的挥发油，用 0.45 μm 孔径微孔滤膜过滤，放至冷冻干燥机，冷冻 干燥 24 h 即得芹菜籽挥发油-羟丙基-β-环糊精包 合物。

3 讨论

目前，包合挥发油的材料主要有 β-环糊精和羟 丙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精是由 β-环糊精 和环氧丙烷缩合而成的一类羟烷基亲水性衍生物， 与 β-环糊精相比具有水溶性好、疏水性空腔大、安 全性好等优点。本研究曾采用 β-环糊精对芹菜籽 挥发油进行包合，但是包合率低且重现性差，β-环 糊精水溶性差，不利于药物溶出。因此本研究采用 羟丙基-β-环糊精包合芹菜籽挥发油，以包合率和 载药量的 OD 值作为评价指标，根据重要程度分配 权重，优化出最优工艺。