丹香清脂颗粒中5种有效成分含量的影响

丹香清脂颗粒是由丹参、川芎、桃仁、降香、大黄等 8 味中药材组方的中药复方制剂，属国家基本药物，收 载于 2015 年版《中国药典( 一部) 》，有活血化瘀、行气通 络功效，临床主要用于治疗高脂血症属气滞血瘀证者。 丹参和川芎为方中君药，有活血、化瘀、活络功效，丹参主要成分有丹参酮ⅡA 和丹酚酸B ，川芎主要成分为藁本 内酯、洋川芎内酯 A 和洋川芎内酯I等。该颗粒现行法 定标准中仅有川芎、大黄和莪术的薄层色谱鉴别项及丹参 酮ⅡA 的含量测定项，用于其质量控制稍显不足。

1 仪器与试药

1．1 仪器

1260 型高效液相色谱仪，包括 G1311A 四元梯度 泵 、G1329A 自 动 进 样 器 、G1314B － DAD 检 测 器 、 G1316A 柱 温 箱、Agilent － Chemistation 数 据 处 理 系 统 ( 美国 Agilent 公司) ; AUW － 220D 型电子分析天平( 日 本 Shimadzu 公司) ; 中药粉碎机( 浙江屹立工贸有限公 司) ; 60 Co － γ 辐照装置( 深圳市金鹏源辐照技术有限公 司) ; KQ － 250DB 型数控超声波清洗器( 昆山舒美超声仪器有限公司) ; LRH － 150B 型生化培养箱( 广东省医疗器械 厂) ; ZOZ － AB 型电热恒温干燥箱( 上海跃进医疗器械 厂) ; YJ － 875 型医用净化工作台( 苏州净化设备厂) 。

1．2 试药

丹香清脂颗粒( 吉林敖东集团大连药业股份有限公 司，批号分别为 170915，171209，180123，180217，180321， 180511，180622，规格为每袋 10 g) ; 丹参酮ⅡA 对照品 ( 批号为 110766 － 201721，含量 99． 5% ) 、丹酚酸 B 对照 品( 批号为 111562 － 201716，含量 94． 1% ) 、藁本内酯对 照品( 批号为111737 － 201608，含量 100． 0% ) ，均购于中 国食品药品检定研究院; 洋川芎内酯 A 对照品( 批号为 62006 － 39 － 7，含量 97． 2%)，洋川芎内酯I对照品( 批号为 94596 －29 －5，含量 97． 5% ) ，均购于上海纯优生物科技有 限公司; 甲醇、乙腈均为色谱纯，其余试剂均为分析纯， 水为超纯水。

2 方法

色谱柱: Agilent Zorbax － C18 柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ; 流动相: 乙腈( A) － 0． 5% 磷酸溶液( B) ，梯度洗 脱( 0 ～ 10 min 时 42% A，10 ～ 25 min 时 42% A→68% A， 25 ～ 40 min 时 68% A→88% A，40 ～ 50 min 时 88% A→ 42%A); 流速: 1． 0 mL /min; 检测波长: 280 nm( 0 ～ 39 min) ， 268 nm( 40 ～ 50 min) ; 柱温: 30 ℃ 。混合对照品溶液: 分别称取各待测成分对照品适量， 精密称定，分别加 80% 甲醇制成每 1 mL 含丹参酮ⅡA 1． 224 4 mg、丹酚酸 B 1． 512 5 mg、藁本内酯 0． 653 7 mg、 洋川芎内酯 A 0． 596 3 mg、洋川芎内酯 I 0． 412 7 mg 的混 合对照品溶液，摇匀，低温避光贮存。供试品溶液: 取装量差异项下样品，研匀，取约 2． 5 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 80% 甲醇 50 mL， 密塞，称定质量，超声处理( 功率 500 W，频率 40 kHz) 45 min，放冷，再称定质量，用 80% 甲醇补足减失的质 量，经 0． 45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。系统适用性试验: 取上述混合对照品溶液、供试品 溶液各适量，按拟订色谱条件进样测定，记录色谱图，详 见图 1。理论板数按各待测成分峰计均大于 3 000，分离度 均大于 1． 5，基线分离良好。

3 讨论

藁本内酯、洋川芎内酯 A 和洋川芎内酯 I 属苯酞类 成分，易受氧化、水解、光解、异构化等影响发生结构改 变。藁本内酯的化学结构为不饱和的苯酞结构，3 位上 有活泼的丁烯基，均为化学不稳定性因素 ; 洋川芎内 酯 A 含有的不饱和环易通过脱氢反应形成更加稳定的 苯环结构 。