茄根又名茄母,为茄科茄属植物茄( Solamum melongena L. ) 的干燥根。茄根作为药用,早已记载 于《开宝本草》、《日用本草》等医书中。其味甘 微苦,具有止痛、祛风利湿、清热止血等功效。民间 多用于治疗牙疼、风湿性关节炎、冻疮、脚气及便血 等病症。茄在我国广泛分布和种植,一般茄子收 获完毕,茄根便当柴烧,对药用资源是一种极大的浪 费。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器
旋转蒸发仪( 型号: N-1300V 型,生产厂家: 东京理化器械株式会社) ; 循环水式多用真空泵( 型号: SHZ-DⅢ,生产厂家: 上海科兴仪器有限公司) ; 电子 分析天平( 型号: XS205DU 型,生产厂家: 上海梅特勒-托利多有限公司) ; 紫外可见分光光度计( 型号: Gold S54,生产厂家: 上海棱光技术有限公司) ; 数控超声波清洗器( 型号: KQ5200DE 型,生产厂家: 昆山舒美超声仪器有限公司) ; 台式电热干燥箱( 型号: 202- 2AB 型,生产厂家: 天津市泰斯特仪器有限公司) ; 水浴锅( 型号: HH. S11-Ni2 型,生产厂家: 北京三二 八科学仪器有限公司) ; 台式低速离心机( 型号: TD4 型,生产厂家: 常州金胜仪器制造有限公司) ; 纯水仪( 生产厂家: MILLIPORE) 。
1. 2 试剂
茄根采自山东省泰安市泰山区上高街道办事处 上高村,由山东省泰安市食品药品检验检测中心中 药科的刁兴斌老师鉴定为茄科( Solanaceae) 茄属植 物( Solanum L. ) 茄的干燥根茎部位; 水: 超纯水( 自 制) ; 石油醚、无水乙醇、浓硫酸、正丁醇、葡萄糖、苯 酚、氯仿、丙酮等均为分析纯。
2 方法与结果
样品处理→脱脂→浸提→抽滤除渣→减压浓缩 →离心→乙醇沉淀多糖→静止离心→粗多糖→复溶 →脱蛋白→醇沉→干燥→精制多糖。脱脂: 称取药材 5. 0 g,置于 250 mL 具塞锥形瓶 中,加入 50 mL 石油醚,密塞后,振摇,超声( 40℃, 频率 40 kHz) 提取 30 min,脱去其表面脂类物质,抽 滤,晾干,重复脱脂 1 次。 浸提: 脱脂晾干后试样,以 1∶ 20 的料液比加入 蒸馏水,在 40℃水浴中超声浸提 30 min,过滤后,在 相同条件下重复提取 1 次。 抽滤除渣: 将 2 次提取液合并,减压抽滤。 减压浓缩: 利用旋转蒸发仪浓缩滤液,约至 20 mL,冷却至室温。 离心和 醇 沉: 将 浓 缩 液 离 心 5 min ( 5000 r/ min) ,弃去沉淀后,缓慢加入无水乙醇( 约 3 倍量) , 不断用玻璃棒搅拌,使多糖充分析出。 静置离心: 将上述溶液静置 1 d 后,在离心机上 离心得粗多糖沉淀。 复溶和脱蛋白: 粗多糖复溶,利用 Sevage 试剂 除蛋白,连续操作到脱除蛋白质完全。 醇沉: 在除去蛋白后的溶液中加入无水乙醇( 3 倍量) 沉淀,依次用石油醚、丙酮、乙醇反复洗涤,离心,干燥,得精制多糖。标准曲线的绘制: 分别精密吸取 0. 0、0. 8、1. 2、 1. 6、3. 2 mL 的 40 μg /mL 的葡萄糖标准溶液,置于 10 mL 具塞刻度试管中,分别在各试管中加入超纯 水至体积为 2. 0 mL,空白试管中加入 2. 0 mL 超纯 水作对照,各管分别加入 6% 苯酚溶液 1. 0 mL,摇 匀,滴加浓硫酸 5. 0 mL,振摇,放置 5 min,置沸水浴 中加热 25 min,迅速冷却,至室温,在 490 nm 波长处 测量吸光度,绘制标准曲线。
3 结 论
本实验采用超声波辅助法对茄根中的多糖进行 提取,用苯酚-硫酸法测其含量。在苯酚-硫酸法的 条件下,测得茄根多糖含量平均为 4. 5% 。该实验 的标准曲线线性关系良好,多糖含量测定结果稳定, 重现性好,回收率高,说明苯酚-硫酸法可以用于测 定茄根中多糖含量,具有一定的推广和参考价值,同 时也为茄根药材的质量控制提供了参考依据。