昆山舒美对品半夏中核苷类成分分析

半夏为天南星科多年生植物半夏 Pinellia ternata ( Thunb. ) Breit. 的干燥块茎，主要分布在我国 长江流域、黄河中下游、淮河流域等广大地区，作 为常用中药，收载于厉版《中国药典》中。半夏最早 出现在《礼记·月令》中，而入药首见于《五十二病 方》，距今已 2100 多年历史。具有燥湿化痰、消 痞散结等功效。药典记载用于湿痰寒痰，咳喘痰 多，痰饮眩悸，风痰眩晕，痰厥头痛，呕吐反胃，胸脘 痞闷，梅核气，外治痈肿痰核。

Agileng 1260 型高效液相色谱仪 ( G4212B 型 DAD 检 测 器，G1312B 型 二 元 泵， G1367E 型高性能自动进样器，G1322A 型脱气机， G1316A 型柱温箱) ; AX224ZH /E 型万分之一电子 分析天平: 常州奥豪斯仪器有限公司; bp211d 型十 万分之一电子分析天平: 德国赛多利斯; KQ － 1000 型医用超声波清洗器: 昆山舒美超声仪器有限公司。

鸟苷( 批号: 118 － 00 － 3) 、尿苷( 批号: 58 － 96 － 8) 、腺苷( 批号: 58 － 61 － 7) 、胞苷( 批号: 65 － 46 － 3) 、胸苷( 批号: 50 － 89 － 5) 、黄嘌呤( 批 号: 69 － 89 － 6) 、腺嘌呤( 批号: 73 － 24 － 5) 、尿嘧啶 ( 批号: 66 － 22 － 8) 、次黄嘌呤( 批号: 68 － 94 － 0) 、 次黄嘌呤核苷( 批号: 58 － 63 － 9) : 均购自南京良纬 生物科技有限公司，纯度均≥98% ; 甲醇: 德国 Merck 公司，为色谱纯; 水为纯净水; 其他试剂均为分 析纯。

样品由安徽万生中药饮片有限公司、安 徽井泉中药饮片有限公司、安徽协和成中药饮片有 限公司、四川源地中药材种植有限公司、甘肃春福 中药材种植有限公司、贵州同德中药饮片有限公 司、四川新荷花中药饮片有限公司帮助收集，21 份 不同产地的半夏样品，均由江苏省中医院朱育凤主 任中药师鉴定为天南星科植物半夏 Pinellia ternata ( Thunb. ) Breit. 的干燥块茎。见表 1。

色谱柱: Agilent Eclipse XDB － C184. 6 mm × 250 mm、5 μm) ; 流动相: 甲醇( A) － 水 ( B) ; 梯度洗脱( 0 ～ 7 min，2 % A; 7 ～ 13 min， 3 % A; 13 ～ 25 min，20 % A; 25 ～ 30 min，2 % A; ) ; 流速: 1 mL·min － 1 ; 柱温: 35 ℃ ; 检测波长: 260 nm; 进样量: 20 μL。

2. 2 溶液的配制

2. 2. 1 供试品溶液的制备

取约 2. 0 g 半夏粉末 ( 过 4 号筛) ，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入石 油醚( 30 ～ 60 ℃ ) 30 mL，超声 30 min( 功率 280 W， 频率53 kHz) ，放冷后，挥去石油醚，精密加入 25 mL 纯水，精 密 称 定，超 声 45 min ( 功 率 280 W，频 率 53 kHz) ，放冷，再称定重量，用水补足减失重量，摇 匀后过滤，取续滤液经 0. 45 μm 微孔滤膜过滤，即 得供试品溶液。

精密称定适量尿 嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸 苷、腺苷对照品，加适量溶剂溶解后，制成浓度分别 为 1. 125、1. 27、1. 265、1. 29、1. 335、1. 38、1. 375、 1. 31、0. 295 g / L 的对照品储备液。

取“2. 2. 2”项下混合对照品 溶液，混合后按比例逐步稀释，得到 6 个不同浓度的 混合标准品溶液，按“2. 1”项下色谱条件进样并记 录峰面积，以色谱峰面积积分值( y) 为纵坐标，浓度 ( x，mg·L － 1 ) 为横坐标进行线性回归，得到各核苷 成分的回 归 方 程 和 线 性 范 围。线性回归结果见 表 2。

不同产地半夏 8 种核苷成分的含量测定结果 与聚类分析,湖南新宁半夏中的 8 种 核苷成分平均总含量( 0. 1459 % ) 高于其它产区种 植的半夏( 河南洛宁、甘肃清水、甘肃西和、四川成 都、贵州、安徽阜南、四川南充及湖北宜昌的半夏中 8 种核苷平均总含量分别为 0. 1377% 、0. 1227% 、 0. 11535% 、 0. 1074% 、 0. 1026% 、 0. 1026% 、 0. 1025% 、0. 0845 % ) ; 其中 2、5、6、13、14、17 号样 品未检测出肌苷含量; 8 号及 17 号样品未检测出腺 嘌呤含量; 实验过程中虽然检测出各样品中含有腺 苷成分，但不明原因导致其稳定性不佳，故未纳入 含量测定统计与加样回收率试验中。聚类分析表 明，贵州赫章与其余产地半夏核苷含量上差异很 大，河南洛宁与湖南新宁、安徽阜南与湖北宜昌、甘 肃西和与贵州凯里、甘肃清水与贵州剑河差异较小。实验对比了乙腈 － 水、乙 腈 － 0. 05 % 磷酸水、甲醇 － 水、甲醇 － 乙腈 － 磷酸二氢钠、醋酸铵 － 甲醇为流动相进行 梯度洗脱，发现当流动性为甲醇 － 水时，在 260 nm 吸收波长下，各核苷组分峰型及分离度较好，故最 终选用甲醇 － 水作为流动相。



 

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