KQ-300DV用于盐酸林可霉素注射液的分析改进

盐酸林可霉素又称盐酸洁霉素，盐酸林可霉素注射液 属于人畜共用药，主要用于治疗革兰阳性菌和支原体感染。 对葡萄球菌、溶血性链球菌抑制作用较强，对厌氧菌如破 伤风梭菌、产气荚膜芽孢杆菌有抑制作用，对猪痢疾密螺 旋体和弓形虫也有一定作用。主要作用于细菌核糖体的 50 s 亚基，抑制肽链延长，干扰细菌蛋白质合成，属生长 期抑菌剂。盐酸林可霉素在治疗各种感染中得到广泛应 用，因此，建立盐酸林可霉素快速而有效的含量检测方法 尤为重要。目前，盐酸林可霉素的含量测定方法有色谱法、 质谱法、光谱法。色谱法中流动相几乎都用到盐溶液， 但质谱法所用仪器昂贵，不利于产品质量控制的推广。

U3000 戴安高效液相色谱仪，配戴安二极管阵列检测 器，美国热电公司；XS105DU 型分析天平 （瑞士 Mettler Toledo 公司）；FE20 型 pH 计 （瑞士 Mettler Toledo 公司）； KQ-300DV 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公 司）。

甲醇、乙腈均为色谱纯，美国 Merck 产品；氨 水、磷酸为分析纯，购自国药集团化学试剂北京有限公司； 实验用水为 milli-Q 超纯水。

盐酸林可霉素对照品（中国食品药品检定 研究院，批号：130432-201109，含量：85.7%）。

盐酸林可霉素注射液供试品 A （规格 10∶ 0.6，mL/g）由标称安徽省某企业生产；盐酸林可霉素注射 液供试品 B、盐酸林可霉素注射液供试品 C （规格 10∶1， mL/g），由标称河北省某企业生产；盐酸林可霉素注射液供 试品 D（规格 10∶0.6，mL/g）由标称山东省某企业生产。

色谱柱：Waters XSelect CSH C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流动相：以磷酸溶液[取磷酸 13.5 mL，加水至 1 000 mL， 用氨水调节 pH 值至（6.0±0.1）]-乙腈-甲醇（80∶15∶15）；流 速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；二极管阵列检测器；扫描波 长：190～400 nm；分辨率 1.2 nm；记录 210 nm 的色谱图； 进样量：10 μL。

精密称 取盐酸林可霉素对照品 250.25 mg，置 25 mL 量瓶中，加流动相稀释并定容至刻度，作为对照品储备液（含林可霉素 约 10 mg/mL）。精密量取适量，用流动相稀释成 2 mg/mL 的系统适用性溶液。 2．2．2 供试品溶液制备 精密量取供试品适量 （约相当 于林可霉素 100 mg），置 50 mL 量瓶中，用流动相稀释并 定容至刻度，即得。

林可霉素在“2.1”色谱 条件下，取系统适用性溶液 10 μL，注入高效液相色谱仪， 记录色谱图及光谱图。结果表明，林可霉素 B 与林可霉素 完全分离，分离度大于 2.1，林可霉素色谱峰理论塔板数 大于 7 000，表明方法专属性良好，说明所选的试验条件 满足测定要求。系统适应性溶液色谱图及相应对照品光谱。

精密量取对照品储备液适量，用流动相稀释 成 0.1 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、1.5 mg/mL、2.0 mg/mL、 4.0 mg /mL 的标准曲线溶液，照“2.1”项下的色谱条件测 定。按峰面积与对应的浓度作标准曲线，并计算回归方程 和相关系数。回归方程及相关系数分别为：Y=7.240 2X2.238 3，R=0.999 9。结果表明，林可霉素在 0.1～4.0 mg/mL 浓度范围内，浓度与峰面积呈现良好的线性关系。

精 密 吸 取 对 照 品 溶 液 10 μL，在 “2.1”项下的色谱条件，连续重复进样 6 次，记录峰面积，6 次林可霉素峰面积的 RSD 为 0.1%，表明仪器精密度良好。

3.1 检测波长的选择 由于林可霉素、林可霉素 B 为末端吸收，在林可霉素 的光谱图中显示最大吸收峰 196.5 nm，但是考虑到流动相 中甲醇、乙腈在紫外末端的影响，所以选定在较高灵敏度 的 210 作为检测波长。本液相方法与《中华人民共和国兽 药典》2015 年版一部的液相色谱方法进行比较，两者在测 定样品中林可霉素含量时，测定结果基本一致（P>0.05）。

3.2 本方法具有减少盐溶液对色谱系统的污染、提高色 谱系统的稳定性、同时简便、准确、重现性好、专属性强， 能够有效的控制该产品的质量，为产品标准改进提供了研究基础。



 

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