精密称取干燥至恒重的葡萄糖对 照品 8mg,加水溶解并定容至 100 ml,摇匀,配制得 80 μg /ml 储备液。6%苯酚溶液现配现用。精密吸取储备液 0. 5、1. 0、 1. 5、2. 0、2. 5、3. 0、3. 5 ml 置于 5 ml 容量瓶中,加水稀释定 容,摇匀,即得对照品溶液。精密吸取上述系列对照品溶 液 2. 0 ml,分别加于 10 ml 具塞试管中,加入苯酚 1. 0 ml,摇 匀,迅速加入浓硫酸 5. 0 ml,立即摇匀,放置,冷至室温。另 取 2. 0 ml 水作空白对照,于 490 nm 波长处测定吸光度( A) , 以葡萄糖含量 C( μg /ml) 为横坐标,以 A 为纵坐标,得回归 方程 A= 0. 0162C+0. 0076( R2 = 0. 9991) ,表明葡萄糖含量在 8~ 48 μg /ml 与 A 呈良好的线性关系。 XL-08B 粉碎机( 广东市旭朗机械设备有限公 司) ; RE- 2000A 型旋转蒸发仪( 上海亚荣生化仪器厂) ; SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵( 郑州长城科工贸有限公 司) ; DHG-9075A 型电热鼓风干燥箱( 上海一恒科学仪器有 限公司) ; BWSsn 电子计重称( 厦门佰伦斯电子科技有限公 司) ; XB 220A 电子分析天平; TDL-40B 离心机( 上海安亭电 子仪器厂) ; UV- 2550 紫外分光光度计( 日本岛津) ; KQ- 500B 型超声清洗器( 昆山市超声仪器公司) 。
以活性炭用量、脱色温度、脱色时间为 单因素考察指标进行单因素试验,取 18 份 LBP 提取液。以 6 份提取液加活性炭,用 量 依 次 为 0. 5%、1. 0%、1. 5%、 2. 0%、2. 5%、3. 0%,恒温水浴温度 60℃ 下脱色 40 min,再分 别离心 30 min,转速为 4000 r/min,总共离心 2 次,测定脱色 后多糖溶液的吸光度; 以 6 份提取液加活性炭,用 量 为 1. 0%,脱色温度依次为 40℃、50℃、60℃、70℃、80℃ 和 90℃,再离心30 min,转速为 4000 r/min,总共离心 2 次,测定脱色后多糖溶液的吸光度; 再以 6 份提取液,加入 1. 0%活性 炭,恒温水浴温度为 90℃,脱色时间分别设为 20、30、40、50、 60、70 min,再 离 心 30 min,转 速 为 4000 r/min,总 共 离 心 2 次,测定脱色后多糖溶液的吸光度。