气相色谱指纹图谱评价沉香化气片质量-KQ2200B使用

沉香化气片收载于《中华人民共和国卫生部药 品标准中药成方制剂》第七册，全方由沉香、木香、广藿香、香附、砂仁、陈皮等 10 味药组成，具有理 气疏肝、消积和胃的功效，用于治疗肝胃气滞、脘腹胀痛、胸膈痞满、不思饮食、嗳气泛酸。其中木香、广 藿香、砂仁和陈皮 4 味药材蒸馏提取挥发油后入药。 广藿香挥发油具有抗炎、抗菌、镇咳及调节胃肠道的功能，百秋李醇为广藿香的主要挥发性成分，也 是广藿香质量评价的指标成分；砂仁挥发油具有明 显的消炎镇痛、抗氧化、促进胃肠运动等多方面的功效，其主要成分为樟脑和乙酸龙脑酯；陈皮性温、 味苦、辛，陈皮挥发油具有很好的促胃动力作用。

1 实验部分

1．1 仪器、试剂与材料

气相色谱仪（ＧＣ－2010）、气相色谱－质谱联用仪 （ＧＣＭＳ－ＴＱ8040）配电子轰击（ＥＩ）源（日本岛津公 司）；1 ／ 10 万电子分析天平（ＳＱＰ，赛多利斯科学仪 器有限公司）；超声波清洗器（ＫＱ－2200Ｂ，昆山舒美超声仪器有限责任公司），Ａｇｉｌｅｎｔ ＤＢ－5（30 ｍ×0. 25 ｍｍ×0. 25 μｍ）色谱柱（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ 公司）。 甲醇（色谱纯，美国天地有限公司），乙醇（分析 纯，重庆川东化工集团有限公司），Ｄ－柠檬烯对照品 （纯度＞98％，批号 Ｚ28Ｄ8Ｈ51809，上海源叶生物科 技有限公司），乙酸龙脑酯对照品和百秋李醇对照品（纯度均＞ 98％，批号分别为 ＭＵＳＴ－18022605 和 ＭＵＳＴ－17073111，成都曼斯特生物科技有限公司）， 正十八烷（纯度＞99％，批号 Ｇ9814，山东西亚化学股 份有 限 公 司），20 批 沉 香 化 气 片 （批 号 分 别 为 18030026、 18020015、 18010007、 18020013、 18030029、 18030024、 18020012、 18030019、 18030023、 17120095、 18040031、 18020016、 18030022、 18030027、 17070058、 18040033、 18010006、18040030、18030021 和 17060049，依次记 为 Ｓ1～ Ｓ20，太极集团）。

1．2 对照溶液的制备

内标溶液：精密称取正十八烷适量，加甲醇制得 浓度为 32. 6 ｍｇ ／ Ｌ 的正十八烷内标溶液。 对照品溶液：精密称取 Ｄ－柠檬烯、乙酸龙脑酯、 百秋李醇对照品适量，加甲醇分别制成质量浓度为 61. 54、37. 5 和 53. 3 ｍｇ ／ Ｌ 的对照品溶液，即得。

1．3 供试品溶液的制备

取 10 片沉香化气片，研匀，精密称定 0. 5 ｇ，置 于具塞锥形瓶中，加入 10 ｍＬ 乙醇，称量，超声（频 率 40 Ｈｚ，功率 100 Ｗ）处理 30 ｍｉｎ，放冷，再称定质 量，用乙醇补足减少的重量，摇匀，静置，取上清液经 滤纸滤过，将滤液过 0. 22 μｍ 有机相微孔滤膜，取 续滤液 1 ｍＬ 置于 5 ｍＬ 量瓶中，精密加入 0. 5 ｍＬ 内标溶液，加乙醇至刻度，摇匀，即得。

1．4 色谱条件

1．4．1 气相色谱条件

色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ ＤＢ－5（30 ｍ×0. 25 ｍｍ×0. 25 μｍ） 柱；载气：氮气；进样口温度：250 ℃；进样模式：分流；分 流比：5 ∶1。程序升温：初始温度为 60 ℃，保持 2 ｍｉｎ， 以 2. 5 ℃ ／ ｍｉｎ 的速率升温至 250 ℃，保持 10 ｍｉｎ。平 衡时间：3 ｍｉｎ；ＦＩＤ 检测器温度：250 ℃；进样量：1 μＬ。

1．4．2 质谱条件

离子源：ＥＩ 源；离子源温度：200 ℃；接口温度： 250 ℃；载气：氦气；溶剂延迟：2. 5 ｍｉｎ；扫描范围： ｍ ／ ｚ 45～500。

2 结果与讨论

选择在气相色谱仪和气相色谱－质谱联用仪上 检测性质稳定、定量准确、易于获得的烷烃。以正十 八烷标准品溶液进样分析，所得谱图与样品谱图重 叠比较，对共有峰无干扰，选择正十八烷为内标参照 峰，如图 1 所示。

样品以超声提取法、回流提取法、冷浸法进行提 取，根据各成分的结构和性质，发现超声提取法和回 流提取法均优于冷浸法，考虑到一些挥发性成分的 热不稳定，且超声提取法简便快捷，故选择超声提取 法。对提取溶剂（甲醇、乙醇、水、30％ （体积分数， 下同）甲醇、50％ 甲醇和 80％ 甲醇）进行考察，结果 表明乙醇对待测成分的提取优于甲醇，故选择乙醇 为提取溶剂。对提取时间（30、45 和 60 ｍｉｎ）进行了 考察，结果表明提取时间≥45 ｍｉｎ 时，提取效果无 明显差异，故选择提取时间为 45 ｍｉｎ。分别精密吸取适量对照品溶液和适量内标溶 液，加甲醇稀释成 6 个不同水平浓度的对照品溶液， 按 1. 4. 1 节方法进样测定，3 个组分在各自的范围 内线性关系良好，相关系数（ｒ）均不小于 0. 999。以 3 个组分的峰面积 ＲＳＤ 来评价定量分析的精密度、 重复性和稳定性，ＲＳＤ 均小于 3％，满足定量分析的 要求。20 批 样 品 中，Ｄ－柠 檬 烯 的 含 量 为 0. 802 ～ 5. 490 ｍｇ ／ ｇ，乙酸龙脑酯的含量为 0. 074 ～ 0. 218 ｍｇ ／ ｇ，百秋李醇的含量为 0. 140 ～ 0. 732 ｍｇ ／ ｇ。各 组分含量的差异可能是所用原药材的成分波动和生 产过程的波动所导致的。

3 结论

本文建立了沉香化气片的气相色谱指纹图谱， 确定了 11 个共有峰，并测定了其中 3 个组分的含 量，结合化学模式识别评价 20 批样品的质量。20 批样品的相似度均大于 0. 9，为了更客观地反映沉 香化气片的内在质量，采用各指标成分的峰面积进 行不同批次样本的化学模式识别，可用于批次间的 区分和归类，主要将 20 批样品分为 2 类，主成分分 析结果能够反映 20 种样本的色谱图直观结果，找到 了引起不同批次间质量差异的主要成分为 Ｄ－柠檬 烯、樟脑、乙酸龙脑酯、4，7－ｍｅｔｈａｎｏａｚｕｌｅｎｅ、α－布藜 烯。以上结果表明气相色谱指纹图谱结合化学模式 识别为沉香化气片的质量控制提供简单、可靠的方法。