珍珠菜提取物的抗缺氧作用-KQ500DE使用！

珍珠菜( Lysimachia clethroides Duby) 为报春花 科植物虎尾珍珠菜的根或全草，又叫扯根菜、山酸汤 秆、通筋草、酸罐罐等。具有活血调经、利水消肿等 功效。可治疗妇女月经不调、小儿疳积、跌打损伤等。目前对珍珠菜的药理学研究主要集中在抗 肿瘤和抗白血病 方面，而关于珍珠菜提取物耐 缺氧的研究却未见报道。本研究建立常压缺氧模 型、亚硝酸钠中毒模型和急性脑缺血性缺氧模型，旨 在探究珍珠菜提取物的耐缺氧作用。

1 材料与方法

1. 1 仪器、试药与动物

ＲT-6000 酶标仪( 美国，雷 杜) ，XFB-200 高速中药粉碎机( 长沙市雨花区中诚 制药机械厂) ，Centrifuge-5427 Ｒ 低温高速离心机 ( 德国艾本德股份有限公司) ，N-1200B 旋转蒸发仪 ( 上海爱朗仪器有限公司) ，SHZ-CD 循环水式多用 真空泵( 巩义市予华仪器有限责任公司) ，JA2003 电 子天平( 上海浦春计量仪器有限公司) ，101-2A 电热鼓风干燥箱( 天津市泰斯特仪器公司) ，KQ500DE 超声波清洗机(昆山舒美超声仪器有限公司) 。 珍珠菜采自贵州省榕江县，经鉴定为珍珠菜全 草; 钠石灰( 成都金山化学试剂有限公司) ; 亚硝酸 钠( 重庆百倍精细化工厂) ; 超氧化物歧化酶( SOD) 和谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 试剂盒( 南京建 成生物工程研究所，生产批号: 20180302) ，红景天胶 囊( 北京同仁堂，批准文号: 国食健字 G20100243) ; 昆明种小鼠 90 只，雌雄各半，体重 18 ～ 22 g。

1. 2 动物分组

将 90 只小鼠随机分为空白组、红 景天组和珍珠菜组，雌雄各半，每组 30 只，每组分别 进行常压缺氧实验、亚硝酸钠中毒实验和急性脑缺 血性缺氧实验。

1. 3 试剂制备

将珍珠菜阴干粉碎，过筛，经 70% 甲醇回流提取 3 次，合并过滤液，浓缩，得浸膏。将 浸膏烘干，按照 1 ml 原药液含生药 1 g 的方法 ，珍 珠菜浸膏的得率为 14. 70%，经计算得出应加水将 珍珠菜浸膏配置成 0. 735 g /ml 的溶液，备用。

1. 4 给 药 剂 量

红景天胶囊的成 人剂量为 40 mg /( kg·d) ，折合成动物的给药剂量，经计算得 出红景天组给药剂量为 0. 063 g /( ml·d) ，珍珠菜组给药剂量为 0. 735 g /( ml·d) ，灌 胃 体 积 均 为 10 g /( ml·d) 。空白组给予等量生理盐水。

1. 5 常压缺氧实验

末次灌胃给药后，将小鼠放入 250 ml 广口瓶内，瓶内放置钠石灰 10 g，上置滤纸， 橡胶塞表面涂抹凡士林，塞紧瓶盖，使装置密闭，记 录小鼠在密闭空间内的存活时间。实验结束后取出 小鼠心脏和大脑，洗净血液，称重，匀浆，按照试剂盒 方法测定心肌和大脑中 SOD 和 GSH-Px 活力 。

1. 6 亚硝酸钠中毒实验

于末次灌胃给药 1 h 后， 小鼠腹腔注射 1 ml /( 10 mg·kg) 亚硝酸钠，记录小鼠 从亚硝酸钠注射完毕到死亡的时间，实验结束后取出 小鼠心脏和大脑，洗净血液，称重，匀浆，按照试剂盒 方法测定心肌和大脑中 SOD 和 GSH-Px 的活力。

1. 7 急性脑缺血性缺氧实验

于末次灌胃给药 1 h 后，各组均在双耳连线处快速断头，记录小鼠断头后 至张口呼吸次数和喘息停止时间( 以小鼠张口呼吸停 止且舌头外露为标准停止计时) 。实验结束后取出小 鼠心脏和大脑，洗净血液，称重，匀浆，按照试剂盒方 法测定心肌和大脑中 SOD 和 GSH-Px 的活力 。

1. 8 统计学方法

采用 SPSS17. 0 软件进行单因素 方差分析、LSD-t 检验。

2 结 果

红景天组和珍珠菜组生 存时间明显长 于空白组，珍 珠菜组存活时间延长了 35. 51%。珍珠菜组心肌中 SOD 和 GSH-Px 活性明显高于空白组，脑组织 GSHPx 活力明显高于空白组( P＜0. 05) ，见表 1。红景天组和珍珠菜 组生存时间明 显长 于 空 白 组 ，珍珠菜组存活时间延长了 20. 14%。珍珠菜 组心肌和脑组织中 SOD 和 GSH-Px 活性均明显高于 空白组( P＜0. 05 或 P＜0. 01) 。见表 2。红景天组和珍 珠 菜 组 生 存 时 间明显长于空白组，珍珠菜组存活时间延长了 55. 29%。 珍珠菜组心肌和脑组织中 SOD 和 GSH-Px 活性均明 显高于空白组( P＜0. 05 或 P＜0. 01) 。见表 3。


3 讨 论

珍珠菜属植物中的主要化学成分为三萜及其皂 苷类、黄酮及其皂苷类、甾醇类、苯并内酯及有机酸类 。研究表明，黄酮类化合物有较好的抗氧化 活性和清除自由基能力，从而对缺氧引起的机体氧 化损伤具有保护作用 。缺氧是临床上常见的病 理过程，可导致多种疾病发生，引起机体代谢、功能 甚至结构异常，严重或长期缺氧可导致机体心脑等 重要器官死亡。小鼠在密闭环境中受到缺氧的损 害，主要反映在心脏和脑部。本实验结果表明，珍珠 菜粗提物能够使小鼠缺氧存活时间延长，有助于改 善机体的缺氧损伤。