KQ-500DE使用于的降脂活性研究的分析

黑果枸杞 （Ｌｙｃｉｕｍｒｕｔｈｅｎｉｃｕｍ Ｍｕｒｒ．）又名黑 枸杞，是茄科植物枸杞属的一种球形浆果。多为棘 刺灌木，分枝多、白色，皮薄，熟后成紫黑色。主要种 植于中国的新疆、青海、宁夏、甘肃等西北地区。黑 果枸杞含有多种维生素、矿物质、原花青和糖类素等 丰富的营养成分。藏医称其名为“旁玛”，被认为其 性平、味甘、清心热，主要用于心脏病、月经异常、心 热病等疾病的治疗中。《中药志》中载有将黑枸杞根 皮和果实用于医治齿龈出血、尿道结石和癣疥等疾 病中，具有润肺止咳、清肺降火、补肾益精和养肝明 目等功效。现代医学研究表明，黑枸杞中的 黄 酮 类成分还具有降低总胆固醇、抗炎、降血糖等作用。

ＫＱ－５００ＤＥ型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），ＨＷＳ－２４型电热恒温水浴锅 （上 海 一 恒 科 学 仪 器 有 限 公 司 ），德 国 梅 特 勒 ＡＢＪ２２０－４ＮＭ 型电子分析 天 平（规 格 为０．００５～０．１ ｍｇ，上海岛韩实业有限公司），ＥＹＥＬＡＮ－１１００型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司），组织匀浆器（上求精玻璃仪器厂），德 国 ＳｉｇｍａＳ－１８Ｋ 型 离 心 机 （北京鑫盛 鸿 阳 科 技 有 限 公 司），ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＭｕｌｔｉｓｋａｎＧＯ 全波长酶标仪（北京金业德祥生物科技有限公司）。

灌 胃 器 材，手 术 器 械（１套），一 次 性 普 通真空采血管和采血针，９６孔细胞培养板，２．０ｍＬ 冻存管（圆底可立，外旋盖），５．０ｍＬ离心管，１．５ｍＬ 微量 离 心 管 （带 锁 扣，透 明 尖 底），ＹＹＱ－１００Ｐ 移 液枪。

辛 伐 他 丁 片（杭州默沙东制药有限公 司，批号：２０１８０４２３），总胆固醇（ＴＣ）检测试剂盒（南 京建成生物工程研究所，批号：２０１８０５２６），甘油三酯 （ＴＧ）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号： ２０１８０５２６），低 密 度 脂 蛋 白－胆 固 醇（ＬＤＬ－Ｃ）检 测 试 剂盒（南京建成生物工程研究所，批 号：２０１８０５２６）， 高密度脂 蛋 白－胆 固 醇（ＨＤＬ－Ｃ）检 测 试 剂 盒（南 京 建成生物 工 程 研 究 所，批 号：２０１８０５２６），无 水 乙 醇 （天津市大 茂 化 学 式 机 厂，批 号２０１７０７０１），石 油 醚 （天津市富宇精细化工有限公司，批 号：２０１６０７１６）， 胆固醇（上 海 蓝 季 有 限 公 司，批 号１８０１１０），胆 酸 钠 （上海蓝季有限公司，批号：１８０３０５），丙基硫氧嘧啶 （上海蓝季有限公司，批号：１８０３１７），水合氯醛（国药 集团化学试剂有限公司，批号：２０１６０１２５），复方氯化 钠注射液（国药集团新疆制药有限公司，生产批号： １８１０００３），普通级别大鼠维持饲料（新疆医科大学实 验动物中心提供）。

雄 性 ＳＤ 大 鼠，体 质 量 （２００± ２０）ｇ，ＳＰＦ级饲养 环 境，批 号：２０１８０３２１，合 格 证 号： ＳＣＸＫ（新）２０１５－０００３，由新疆医科大 学 实 验 动 物 中 心提供。

黑果枸杞（采自新疆阿克苏地区塔里木 盆地），经新疆医科大学药学院生药教研室帕丽达· 阿不力孜教授鉴定为黑果枸杞 （Ｌｙｃｉｕｍｒｕｔｈｅｎｉｃｕｍ Ｍｕｒｒ．）的果实。

本 研 究 是 黑 果 枸 杞系列研究的一部分。该研究中总黄酮的提取方法参 考了以往研究中已确立的提取工艺方法。方法 为将黑果枸杞研磨成粉末状包裹在滤纸里放入索氏 提取器中，在９０℃、１５０ｍＬ 石 油 醚 中 进 行 脱 脂２ｈ 得到经脱脂的黑果枸杞粉末物。将经脱脂过的黑果 枸杞粉末物，设定超声功率为７０Ｗ、温度为６０℃，用 体积分数为７０％ 乙醇为溶剂，料液比为１∶５ｇ／ｍＬ 的条件下 超 声 提 取 ４５ ｍｉｎ，然 后 旋 转 蒸 发 浓 缩 滤 液、冷冻干燥得粗提物（含量达到４．０％），备用。

高 脂 饲 料 由 按 成 分 比 为 ６５％大鼠普 通 维 持 饲 料＋１０％猪 油 ＋２０％ 蔗 糖 ＋ ２．５％胆固醇＋１％胆 酸 钠＋０．５％丙 基 硫 氧 嘧 啶＋ １％混合调和剂（鸡蛋黄＋花生）组成。

ＳＤ 大 鼠 先 在 饲 养 温 度（２４ ±２）℃，湿度（５０±１０）％，明 暗 周 期１２ｈ的 环 境 下 自由饮水，并给予普通饲料饲养１周后，按照体质量 随机分配２组，其中１５只大鼠继续给予大鼠普通维 持饲料空白对照组，其余７５只大鼠给予高脂饲料建 立高脂血症模型组。每周称量体重１次，造模３周 后，每组取若干大鼠断尾采血（期间大鼠不禁食），血 浆凝固后，放入离心机３５００ 转／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ， 分离血清，取 出 上 清 液，测定大鼠血清中甘油三酯 （ＴＧ）、血清 总 胆 固 醇（ＴＣ）、高 密 度 脂 蛋 白－胆 固 醇 （ＨＤＬ－Ｃ）和低密度脂蛋白－胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）的浓度。

剂 量 的 确 定 选 取 造 模 成 功 的ＳＤ大鼠６０只，随机分为６组（每组１０只），分别 为正常对照组（ＮＣ 组）、高脂血症模型组（ＭＣ 组）、 辛伐他汀组（３．３ｍｇ／ｋｇ，Ｓ组）以及黑果枸杞总黄酮 粗提 物 高 剂 量 组 （１００ ｍｇ／ｋｇ，ＨＦ 组）、中 剂 量 组 （５０ｍｇ／ｋｇ，ＭＦ 组）和 低 剂 量 组 （２５ ｍｇ／ｋｇ，ＬＦ 组）。辛伐他汀片剂对高脂血症患者的最大剂量推 荐量为３０ｍｇ，根据ＳＤ大鼠和人体表面积的换算方 法，将高脂血症大鼠的给药剂量换算成３．３ｍｇ／ｋｇ。 黑果枸杞总黄酮粗提物高、中、低剂量组给药剂量通 过查阅文献的方法，最终确立为分别为１００、 ５０、２５ｍｇ／ｋｇ。

实验后各组ＳＤ大 鼠的体质量均呈现增高趋势。但是正常对照组、模 型组和黑果枸杞总黄酮粗提物低剂量组 ＳＤ 大鼠的 体质量增重率较为显著，与其余组相比差异具有统 计学意义 （Ｐ ＜０．０１），说明黑果枸杞总黄酮粗提物 低剂量组对抑制高脂血症 ＳＤ 大鼠体质量的增长效 果并不明显。辛伐他汀组、黑果枸杞总黄酮粗提物 高剂量组、中剂量组与其余组相比，对高脂血症 ＳＤ 大鼠体质量的增长率有抑制作用，差异均有统计学 意义 （Ｐ ＜０．０５），说明高剂量与中剂量的黑果枸杞 总黄酮粗提物同辛伐他丁都具有减缓高脂饲料对高 脂血症ＳＤ大鼠体质量增长的效果，结果见表１。

４ 讨论

高脂血症往往会使机体脂质代谢紊乱，导致血 清或 肝 组 织 中 的 ＨＤＬ－Ｃ 水 平 降 低 或 者 ＬＤＬ－Ｃ、 ＴＧ、ＴＣ等水 平 增 高。本实验结果显示，黑 果 枸 杞 总黄酮粗提物中、高剂量组和辛伐他汀组相同，都具 有减缓高级脂 肪 饲 料 对 ＳＤ 大 鼠 体 重 增 长 的 效 果， 且与正常 对 照 组 相 比 差 异 具 有 统 计 学 意 义 （Ｐ ＜ ０．０１）。从ＳＤ大鼠肝指数的影响水平看，黑果枸杞总黄酮粗提物中、高剂量组、辛伐他汀组与高脂模型 组比较，肝指数显著降低 （Ｐ ＜０．０５）。从血清和肝 脏中有关脂蛋白浓度的变化情况可以看出，与高脂 血症模型组相比，黑果枸杞总黄酮粗提物中、高剂量 组同辛伐他汀组大鼠血清和肝组织中 ＨＤＬ－Ｃ浓度 升高且差异具有统计学意义 （Ｐ ＜０．０５），ＴＧ、ＴＣ、 ＬＤＬ－Ｃ 浓度降低且差 异具有统计学意义 （Ｐ ＜ ０．０１），可以进一步说明黑果枸杞总黄酮具有调血脂作用，并与其剂量呈正相关。