花生油中黄曲霉毒素升级（KQ500E应用）

    黄曲霉毒素(aflatoxins, AFs)是黄曲霉和寄生曲霉等某 些菌株产生的次级代谢产物, 主要包括黄曲霉毒素 B1 (aflatoxin B1, AFB1)、黄曲霉毒素 B2 (aflatoxin B2, AFB2)、黄 曲霉毒素 M1 (aflatoxin M1, AFM1)、黄曲霉毒素 M2 (aflatoxin M2, AFM2)、黄曲霉毒素 G1 (aflatoxin G1, AFG1)、黄曲霉毒 素 G2 (aflatoxin G2, AFG2)等多种毒素。Waters-Xevo-TQ-MS 超高效液相色谱-三重四极杆质 谱仪、Waters ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱(50 mm× 2.1 mm, 1.7 μm)(美国 Waters 公司); 3 mL-25 T 黄曲霉毒素 B1 免疫亲和柱(天津赛奥斯生物科技有限公司); KQ-500E 超声仪(昆山市超声仪器有限公司); Milli-Q 去离子水发生 器(美国 Millipore 公司); CR21GIII 大容量高速离心机(日 本 Hitachi 公司); QL-866 涡旋混合仪(海门市其林贝尔仪 器制造有限公司); HH-100 恒温混匀仪(杭州佑宁仪器有限公司)。

    免疫磁性微球是基于抗原抗体特异性结合进行富集净 化, 因此抗原和抗体的结合条件直接影响微球的富集净化 效果。基抗原和抗体的结合反应通常 在 pH 为 6~8 时效果最好, pH 过高或过低都将影响抗原与抗 体的结合能力, 目前常用抗原、抗体反应的 pH 为 7.4, 因此 在后续的实验中也选择 pH=7.4 的 PBS 作为反应缓冲 溶液。对于抗原和抗体的结合温度, 通常抗原与抗体结合温 度范围在 15~40 °C 间, 温度过高会影响抗体活性, 本研究 选择 37 °C 作为抗原抗体结合的反应温度。在以上条件下, 本研究从免疫磁性微球的用量、提取时间、洗脱体积与洗脱 时间 4 个方面对方法进行优化。